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貨號 | A01X951 | 規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 |
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商品介紹:
產品名稱 | SK-BR-3+LUC人乳腺癌細胞 | 貨號 | A01X951 |
規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 | 英文名 | SK-BR-3+LUC |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
公司所有產品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業或科研等非醫療目的。
細胞凍存注意事項:
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候,這時細胞生長狀態好,細胞數量也多,并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸,活細胞記數。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml ),加入已經配好的等體積的培養液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細胞的培養液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數細胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細胞可保存在氣態層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態層,因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內只能存儲少量液氮,需要經常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產品:
HMGB-1(Mouse High mobility group protein B1) ELISA Kit 小鼠高遷移率族蛋白B1Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-CD229/SLAMF3/FITC 熒光素標記CD229抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-human IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的驢抗人IgG 規格 0.1ml
Mouse neurofilament protein,NF ELISA Kit 小鼠神經絲蛋白 96T
MTM1 英文名稱: 肌微管素1抗體 0.2ml
A2BP1 英文名稱: 共濟失調蛋白2結合蛋白1抗體 0.2ml
Anti-CD229/SLAMF3/FITC 熒光素標記CD229抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
HBeAb(Mouse hepatitis B virus e antibody) ELISA Kit 小鼠乙型肝炎e抗體Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-Caspase-13/FITC 熒光素標記半胱胺酸蛋白酶蛋白-13抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ELAVL1/HuR ELAVL1抗體 規格 0.2ml
I CTP ELISA Kit 小鼠Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽 96T
MTLR 英文名稱: 胃動素受體抗體 0.1ml
Apg10 英文名稱: 自噬相關蛋白10抗體 0.2ml
Anti-Caspase-13/FITC 熒光素標記半胱胺酸蛋白酶蛋白-13抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
sEPCR(Mouse soluble endothelial protein C receptor) ELISA Kit 小鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-CANX/FITC 熒光素標記抗鈣連蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ENAH/MENA ENAH蛋白抗體 規格 0.2ml
Plant Indole-3-acetic acid ,IAA ELISA Kit 植物吲哚乙酸 96T
MTLC 英文名稱: 致癌基因抗體 0.2ml
APOA4 英文名稱: 載脂蛋白A4抗體 0.1ml
Anti-CANX/FITC 熒光素標記抗鈣連蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
PY(Mouse pyridinium crosslink/PyriLinks) ELISA Kit 小鼠吡啶交聯物Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-CD44/PE 熒光素PE標記CD44抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DR6/CD358 細胞調亡素/壞死因子受體死亡受體6抗體 規格 0.2ml
HSV- I IgM 單皰疹Ⅰ型病毒 IgM(捕獲法一步法)
MTHFR 英文名稱: 亞甲基四氫還原酶MTHFR抗體 0.1ml
ARH 英文名稱: 低密度脂蛋白受體銜接蛋白抗體 0.2ml
Anti-CD44/PE 熒光素PE標記CD44抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
L-Selectin/CD62L ELISA Kit 大鼠L選擇素Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-AK-1/FITC 熒光素標記腺苷酸激酶-1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FBXL21/FBL3B FBXL21蛋白抗體 規格 0.2ml
HL(Mouse hepatic lipase) ELISA Kit 小鼠肝脂酶 96T
SK-BR-3+LUC人乳腺癌細胞MTGR1 英文名稱: 髓易位基因相關蛋白1抗體 0.1ml
A2LD1 英文名稱: A2LD1蛋白抗體 0.2ml
Anti-AK-1/FITC 熒光素標記腺苷酸激酶-1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
操作步驟:
(1) 細胞系培養:取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養液,37℃ CO2培養密度至40%~60%,密度過大,轉染后不利篩選細胞。
(2) 轉染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)
A液:用不含血清培養基稀釋1ug 質粒DNA。
B液:用不含血清培養基稀釋2ul脂質體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉染準備:用1mL不含血清培養液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養液。
(5) 轉染:把A/B復合物緩緩加入培養液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉染液,換入正常培養液繼續培養。
(6) 瞬時轉染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。
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