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貨號 | FS-X10172 |
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產品介紹:
用途: 漿細胞核深藍色,胞質灰藍色。 儲存條件:室溫,避光,6個月 |
中文名稱:天青A-伊紅染色液
英文名稱:
產品規格:2×50ml
貨號:FS-X10172
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
總狀毛霉G蛋白偶聯受體GPR91蛋白抗體Human GPER(G-protein coupled estrogen receptor 1) 腎上腺髓質(ADM)免疫試劑盒
福山假絲酵母葡萄糖轉運蛋白8抗體Human VWA1 神經型一氧化氮合成(nNOS)免疫試劑盒
玉黑粉菌糖蛋白C抗體Human WDFY4 神經膠質纖維性蛋白(GFAP)免疫試劑盒
豌豆根瘤菌γ基丁運載蛋白1抗體Human VTI1B 凝血抗凝血復合物(TAT)免疫試劑盒
根瘤菌GATA結合蛋白2抗體Human VWA2 腦鈉/腦鈉尿肽(BNP)免疫試劑盒
尖角凸臍蠕孢生長休止特定蛋白7抗體Human WDR1 內皮型一氧化氮合成(eNOS)免疫試劑盒
深層大洋芽孢桿菌磷化谷受體1抗體Human WDR13 內皮1(ET-1)免疫試劑盒
假單胞菌G蛋白偶聯受體116抗體Human ZP3(Zona pellucida sperm-binding protein 3) 內(ET)免疫試劑盒
釀酒酵母鳥調節蛋白12抗體Human WAPL/WAPAL 免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒
*禾谷鐮刀菌磷化膠質纖維性蛋白抗體Human WSB2 類風濕因子(RF)免疫試劑盒
大腸埃希菌磷化G基丁B型受體2抗體Human WFDC1 巨噬移動抑制因子(MIF)免疫試劑盒
羊泰勒蟲(崇信株)磷化G基丁B型受體2抗體Human MC4R(Melanocortin receptor 4) 巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫試劑盒
凍干粉 厭氧亞硫鹽還原梭菌(定量) 生長分化因子10抗體(TGF-β超家族10)Human WDR40A 巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒
慢生根瘤菌G蛋白偶聯受體LOC51210蛋白抗體Human WDR45 膠原I(Collagenase I)免疫試劑盒
香菇生長抑制蛋白34Human WDR4 甲狀旁腺激(PTH)免疫試劑盒
花腐鐮孢生長激抗體Human WDR5 基質金屬蛋白11(MMP11)免疫試劑盒
醋化醋桿菌Acetobacter│aceti 質量規格:分析標準品,≥99.5%(GC)7-乙氧基莫諾
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規格:standard for GC山茱萸新I
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:分析標準品,≥99.5%(GC)4-羥基異亮
天青A-伊紅染色液不吸水鏈霉 4-Boc-2-基并Syndecan-1;CD138
芽孢桿 4,6-二-2-氨基Tau蛋白
貝倫格葡萄座腔 1-Boc-2-酮Toll樣受體2
白被黑蛋巢 4-溴-2-甲氧基苯乙Toll樣受體3
根瘤 N-BOC-1,2,3,6-四氫吡啶Toll樣受體4
嗜乳桿 1-苯基-3-羥甲基哌Toll樣受體6
中慢生華癸根瘤 6-甲氧基-8-硝基喹啉TβRII
毛木耳(紫木耳、黃背木耳) 辛T亞群
支氣管敗血波氏 5-溴氨基甲酯T球蛋白粘蛋白分子3
運動節桿 2-氟苯乙USP21
白僵 東莨菪鹽鹽WNT1可誘導信號轉導途徑蛋白1
釀酒酵母 五苯α1性糖蛋白
曲霉 2-噻吩甲酰αL艾杜糖
球毛殼 2-氨基-5-羥基吡啶鹽鹽αL巖藻糖
大腸埃希 乙仲辛酯α-防御
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