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原代肥大細胞培養體系

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具體成交價以合同協議為準

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品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-18 15:54:56瀏覽次數:403次

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產地 國產 加工定制
適用領域 科研 貨號 FS-01X9974
原代肥大細胞培養體系公司正在出售的產品:新生兒表皮角化細胞規格:5 × 105次方(1ml)
成人表皮角化細胞規格:5 × 105次方(1ml)
胎兒真皮成纖維細胞規格:5 × 105次方(1ml)

產品屬于:

產品名稱:原代肥大細胞培養體系    

產品規格:100ml/500ml

貨號:FS-01X9974

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運輸溫度(℃):2-8℃/-20℃   

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細胞培養的優點:

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

注意事項:

1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。

2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。

3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。

4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。

6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。

7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 Angiopoietin 4 (ANGPT4)血管生成4(ANGPT4)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Integrin Alpha D (ITGaD)整合αD(ITGαD)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Lipopolysaccharide Binding Protein (LBP)脂多糖結合蛋白(LBP)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Angiopoietin 4 (ANGPT4)血管生成4(ANGPT4)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Angiopoietin 4 (ANGPT4)血管生成4(ANGPT4)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Troponin I Type 3, Cardiac (TNNI3)心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Alkaline Phosphatase (ALP)堿性磷(ALP)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Cluster Of Differentiation 6 (CD6)CD6分子(CD6)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Alkaline Phosphatase (ALP)堿性磷(ALP)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Atrial Natriuretic Peptide (ANP)心鈉(ANP)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Apoptosis Inducing Factor (AIF)凋亡誘導因子(AIF)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Apoptosis Inducing Factor (AIF)凋亡誘導因子(AIF)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Mucin 5 Subtype B (MUC5B)粘蛋白5B(MUC5B)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Prolactin (PRL)催乳(PRL)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type N (PTPRN)蛋白酪磷受體N(PTPRN)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Cyclophilin B (CYPB)親環B(CYPB)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Inhibin Binding Protein (INHBP)抑制結合蛋白(INHBP)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Lysozyme (LZM)溶菌(LZM)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T
原代肥大細胞培養體系HORMAD2  異質核糖核蛋白U2樣蛋白抗體規格: 0.2ml

HRP2  肝癌衍生生長因子2抗體規格: 0.2ml

C22orf31  22號染色體開放閱讀框31抗體規格: 0.2ml

CDC37L1  細胞分裂周期37樣蛋白1抗體規格: 0.2ml

CDK5RAP1  CDK5激活結合蛋白1抗體規格: 0.2ml

CDK5RAP2  CDK5激活結合蛋白2抗體規格: 0.2ml

CINP  CDK2相互作用蛋白抗體規格: 0.2ml

CDK14/PFTK1  周期蛋白依賴性激14抗體規格: 0.2ml

 


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