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貨號	FS-X10166

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：線蟲活體染色液(碘法)

英文名稱：

產品規格：100ml

貨號：FS-X10166

產品介紹:

用途：

主要用于觀察植物組織內部的線蟲，特別是根內線蟲材料。

注意事項：

主要由碘等組成。

儲存條件：室溫，避光，12個月

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

大腸埃希氏桿菌卷曲蛋白6抗體Human ZC3H4 雞睪(T)免疫試劑盒

三線鐮刀菌卷曲蛋白8抗體Human ZDHHC9 雞甘油-3-磷脫氫(GAPDH)免疫試劑盒

北京擲孢酵母FSD1蛋白抗體Human ZDHHC7 雞甘肽(GAL)免疫試劑盒

ATCC 700425卷曲螺旋結構域蛋白10抗體Human ZBP1 雞鈣結合蛋白(CALB2)免疫試劑盒

哈茨木霉Prader-Willi綜合征相關蛋白抗體Human ZBTB11 雞分泌型免疫球蛋白A(SIgA)免疫試劑盒

釀酒酵母AKT相互作用蛋白蛋白抗體Human ZBTB25 雞肺炎支原體(MP)抗體(IgG)免疫試劑盒

發光假蜜環菌DNA解旋V抗體Human YPEL5 雞多巴(DA)免疫試劑盒

豇豆慢生根瘤菌遠端上游元件結合蛋白3抗體Human LGMN(Legumain) 雞凋亡相關因子(FAS)免疫試劑盒

紫皮蘑巖藻糖變旋抗體Human YTHDC1 雞低密度脂蛋白(LDL)免疫試劑盒

樊氏鹽單胞菌X三體綜合征相關蛋白FUNDC1抗體Human ZBTB37 雞的牛血清白蛋白(BSA)免疫試劑盒

芽胞桿菌弗林蛋白抗體Human YTHDF1 雞膽囊收縮A受體(CCKAR)免疫試劑盒

小弧菌富含絲/精重復結構蛋白抗體Human YTHDF2 雞單純皰疹病Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)免疫試劑盒

矮棒曲霉巖藻糖基轉移6抗體Human ZBTB38 雞催乳(PRL/LTH)免疫試劑盒

擬青霉巖藻糖基轉移7抗體Human ZBTB40 雞促腎上腺皮質激(ACTH)免疫試劑盒

橙黃硬皮馬勃眼睛和頭發顏色相關蛋白FUZ抗體Human ZBTB44 雞促卵泡(FSH)免疫試劑盒

短柄帚霉濾泡型轉運蛋白1/II型慢性淋巴性白血病抗體Human YTHDF3 雞促甲狀腺(TSH)免疫試劑盒

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規格：1000μg/ml in 10% HCl金合歡;槐

曲霉Aspergillus│oryzae 質量規格：1000μg/ml,基體:1mol/L HNO3大黃-8-O-葡萄糖

: AS3.3390資源名稱: 淡紫犁頭霉質量規格：100µg/ml,,基體:1%HNO3正丁基酞;丁基酞內酯
線蟲活體染色液(碘法)農研所芽孢桿 2-苯氧基吡啶25羥基維生D3

葡萄生擬莖點霉四-(4-)乙烯3,4二羥基

芽孢桿屬 2-氨基-3-甲氧基吡4-羥基壬烯

釀酒酵母 6-羥基-4-嘧啶5羥基乙

釀酒酵母己5羥色

枯草芽孢桿縮二乙5-羥色受體7

吉氏芽孢桿 1-己基吡啶四氟鹽6酮前列腺F1α

不動桿 4-吡啶-2,6-二羧8羥基脫氧鳥

芽胞桿 4-乙氧基-2-氟苯8異前列腺

枯草芽孢桿斯氏亞種 2,5-雙(錫烷基)噻吩并[3,2-b]噻吩8-異前列腺F2α

脫葉鏈霉甘氨酰-L-天冬Ⅰ型膠原C端肽

新月彎孢 7-氮雜-3-甲Ⅰ型膠原N末端肽

巴斯德畢赤酵母 2-溴噻唑-5-甲Ⅰ型膠原α1鏈

漢遜德巴利酵母 5-溴-3,4-二Ⅰ型膠原吡啶交聯終肽

曲霉 2-氨基-4-甲基噻吩-3-甲Ⅱ型肺泡表面抗原
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)