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特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產品名稱 | 分類 | 貨號 |
赤羽病病毒(AKAV)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10374 |
PCR技術的定量原理:?
擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數是呈指數形式增加的,隨著反應循環數的增加,最終PCR反應不再以指數形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據最終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
米根霉培養基: CM0085小曲酒。提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28-30℃ 定期移植法;其他
-436℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
枝孢生長條件: 25℃培養基: 14提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no -80℃冰箱凍結法;礦物油法;定期移植法
短小芽孢桿菌能于30℃,堿性菌(pH12), 堿性羧甲基纖維素平板上分泌堿性纖維素酶,形成透明圈模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: 0002生長條件: 30℃
AS2.181釀造醬油模式菌株: no種屬: Zygosaccharomyces│rouxii提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: CM0077生長條件: 28-30℃
大腸埃希菌研究模式菌株: no病料提供形式: 凍干物安全等級: 2培養基: 335生長條件: 37
小刺青霉培養基: 14模式菌株: no白樺根系土壤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1生長條件: 25 定期移植法
球毛殼菌培養基: 14模式菌株: no花生提供形式: 斜面培養物安全等級: 1生長條件: 26 定期移植法
-437℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
優雅食烷菌有機污染物降解菌/石油烴類降解菌模式菌株: no水樣/深層海水提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: 821生長條件: 25℃
魏登施泰芽孢桿菌纖維素降解菌模式菌株: no長期落葉腐殖質層提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: 0002生長條件: 30℃
HBUM74687模式菌株: no安全等級: 1種屬: Streptomyces│sp.土壤提供形式: 凍干物培養基: 0305生長條件: 28℃
短鏈孢霉屬培養基: CM0014抗癌活性提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28C -80℃冰箱凍結
根霉生長條件: 25-28℃培養基: 0014提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Methanobrevibacter smithii模式菌株: 未知
-438℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
MercuryAR500g
SM1213GeneRuler Ultra Low Range DNA Ladder, ready-to-use165
A3256-10GD-(-)-Arabinose D-阿拉伯糖10323-20-310g
甲基綠染色液100ml
Minocycline250mg
異丙醇IsopropanolGCS2ml
SM1771NoLimits 17000bp DNA Fragment218
F0500--5GFast Blue RR Salt 固藍RR鹽14726-29-55g
1g
α-Ketoglutaric Acid100g
大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3(AFP-L3)免疫試劑盒 Human alpha-fetoprotein Lens culinaris aggliin 3,AFP-L3 ELISA Kit
谷胱甘肽還原酶(GR)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
Ratmaixmetalloproteinase9/GelatinaseB,MMP-9ELISA試劑盒大鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanHeparanase,HPAELISA試劑盒人乙酰肝素酶(HPA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanLipoxinA4,LXA4ELISAKit人脂氧素A4(LXA4)ELISA試劑盒規格:96T/48T
赤羽病病毒(AKAV)核酸檢測試劑盒改良MSRV培養基規格:250g用途:用于沙門氏的分離培養
MS培養基(不含有機元素,不含瓊脂和蔗糖)規格:250g用途:用于植物組織培養(不含有機元素,不含瓊脂和蔗糖)
維生素C(抗壞血)規格:10g詳情介紹
瓊脂LT100規格:250g用途:用于食品中細菌計數
水稻赤霉菌培養基規格:250g用途:用于水稻中赤霉菌培養
牛血清白蛋白規格:10g詳情介紹
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