PCR的反應條件：
因擴增片段的大小、反應體積、使用擴增儀器的不同而不同。
◇ 循環次數
根據模板DNA的量以及擴增片段的大小，設定25～30個循環。
如果循環次數太少，擴增量不足；如果循環次數太多，則會出現Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45～68℃之間 (預備實驗可2℃間隔進行)。另外，由于在60～68℃間，也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內設定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時，每kbp大體可設定30秒～1分鐘；當溫度設定在68℃以下時, 時間設定可稍長一些。通常，Anneal溫度太高，有時會得不到擴增產物；Anneal溫度太低時，容易發生非特異性反應。另外，Extension時間太短時，會得不到擴增產物或者會有一些短的非特異性產物優成；而Extension時間太長時，會出現Smear。
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參數規格：
產品名稱：牛呼吸道合胞體病毒（BRSV）核酸檢測試劑盒
產品規格：50T
產品貨號：FS-P10373
產品分類：熒光PCR法
產品運輸：低溫運輸
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產品特點：
本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟 
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）    1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
定量PCR方法：
a、競爭法
選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中，待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增（其中一個引物為熒光標記）。擴增后用內切酶消化PCR產物，競爭性模板的產物被酶解為兩個片段，而待測模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產物分開，分別測定熒光強度，根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。
b、內參照法
在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物，內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記，下游引物不標記。在模板擴增的同時，內標也被擴增。在PCR產物中，由于內標與靶模板的長度不同，二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來，分別測定其熒光強度，以內標為對照定量待檢測模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物，擴增產物被固相板上特異的探針所結合，再加入抗di高辛或生物素酶標抗體－辣根過氧化物酶結合物，最終酶使底物顯色。常規的PCR－ELISA法只是定性實驗，若加入內標，作出標準曲線，也可實現定量檢測目的。
實時熒光定量PCR：
實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的局限，實現了每一輪循環均檢測一次熒光信號的強度，并記錄在電腦軟件之中，通過對每個樣品Ct值的計算，根據標準曲線獲得定量結果。因此，實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的：
1）Ct值的重現性PCR循環在到達Ct值所在的循環數時，剛剛進入真正的指數擴增期（對數期），此時微小誤差尚未放大，因此Ct值的重現性，即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系，可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定，因此，實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確，重現性*定量方法，已得到的*，廣泛用于基因表達研究、轉基因研究，藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。
產硫芽孢桿菌近海細菌模式菌株: no水樣/表層溫泉水提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: 471生長條件: 50℃

球孢白僵菌培養基: 14模式菌株: no幼蟲提供形式: 斜面培養物安全等級: 1生長條件: 25 -80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法；定期移植法

蠟狀芽孢桿菌石油降解模式菌株: no污泥提供形式: 凍干物安全等級: 2培養基: 0002生長條件: 30℃

 -434℃冰箱凍結；真空冷凍干燥

釀酒酵母果酒釀造模式菌株: no葡萄提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: CM0007生長條件: 35℃

近平滑假絲酵母近海酵母模式菌株: no生物樣/尖葉鹵蕨莖提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: 513生長條件: 28℃

尼安薩沙門氏菌培養基: CM005111　z　z6提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no生長條件: 37℃ -80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法

NBRC3425T=IFO3425=ATCC7469分類學研究。用于葉輔酶研究、胞外核酶研究、乳脫氫酶性能測定、葉實驗、尼克實驗、泛實驗和核黃素實驗等研究；用于益生菌類保健食品。模式菌株: yes種屬: Lactobacillus│rhamnosus提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: CM0793生長條件: 30℃

根瘤菌培養基: 63模式菌株: no根瘤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1生長條件: 28 定期移植法

香菇食用模式菌株: no朽木提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: 14生長條件: 25℃

 -435℃冰箱凍結；真空冷凍干燥

盤多毛孢霉云南松外生菌根菌模式菌株: no云南松根提供形式: 斜面培養物；凍干物安全等級: 1培養基: 14生長條件: 28℃

正青霉屬抗真菌；抗白色念珠菌模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: CM0018生長條件: 28C

柱狀田頭菇（茶樹菇、楊樹菇）生長條件: 25℃培養基: 0014提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結法；礦物油法；定期移植法

 IFFI2335淀粉原料發酵檸檬模式菌株: no種屬: Aspergillus niger van Tieghem提供形式: 凍干粉安全等級: 1培養基: 綜合PDA：20%馬鈴薯汁1L，葡萄糖20g ，KH2PO4 3g， MgSO4.7H2O 1.5g，硫胺素微量，瓊脂 15g，pH 自然。生長條件: 25-28℃，好氧

豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌培養基: 184科研及血清定型提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no生長條件: 37 真空冷凍干燥法;

鉻鉀potewwium chromateAR500g

SM1223O`GeneRuler Ultra Low Range DNA Ladder, ready-to-use196

A3131-10GL-(+)-Arabinose L-阿拉伯糖5328-37-010g

Membrane and Cytosol Protein Extraction Kit100T

美滿霉素(二四環素)50mg

異丙本CumeneGCS2ml

SM1541NoLimits 20000bp DNA Fragment181

F0500-5GFast Blue RR Salt 固藍RR鹽14726-29-55g

放現菌酮 (環已酰亞胺)100mg

α-酮戊二25g

大鼠一氧化氮(NO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)免疫試劑盒 Human alpha-fetoprotein Lens culinaris aggliin 2,AFP-L2 ELISA Kit

硫氧還蛋白氧化還原酶(xR)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣

Ratmelanocyteaibody,MCAbELISA試劑盒大鼠黑色素抗體(MCAb)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Humanheparinassociatedaibody,HITELISA試劑盒人抗肝素PF4復合物抗體/HIT抗體(HIT)ELISA試劑盒規格：96T/48T

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牛呼吸道合胞體病毒（BRSV）核酸檢測試劑盒DNA酶甲基綠瓊脂基礎規格：100g用途：用于彎曲桿菌的DNA酶水解試驗（GB標準）需添加甲基綠溶液

明膠規格：20支詳情介紹

綠膿菌素測定培養基（PDP）規格：250g用途：用于綠膿桿菌的綠膿菌素測定試驗（GB標準）

腸桿菌科細菌成套生化鑒定管規格：16種/盒*10盒用途：用于腸桿菌科細菌的生化鑒定，包括半固體瓊脂，鳥氨脫羧酶肉湯，賴氨脫羧酶肉湯，氨基脫羧酶對照，西蒙氏枸櫞鹽，硫化氫，蛋白胨水（色氨肉湯），MR-VP（2支），丙氨，甘露醇，肌醇，山梨醇，蜜二糖，核糖醇（側金盞花醇），棉子糖共17種生化鑒定管和配套試劑（甲基紅試劑，V-P試劑，FeCl3,液體石蠟，靛基質試劑）（需甲基紅試劑盒、V-P試劑盒、Kovace靛基質試劑盒配套使用。）

甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂基礎（MYP）規格：50%卵黃乳液用途：5ml

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