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Masson三色染色液

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 14:29:08瀏覽次數:179次

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貨號 FS-X9958
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P

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱:Masson三色染色液

英文名稱:

產品規格:7×50ml|7×100ml

貨號:FS-X9958

產品介紹:

用途:

經典膠原纖維染色,可區分膠原纖維和肌纖維。

注意事項:

染核后能更容易區分膠原纖維和肌纖維,本試劑盒采用經典的Weigert蘇木素。其結果為:膠原纖維呈藍色,胞核呈藍褐色肌纖維、紅細胞等呈紅色。

儲存條件:室溫,避光,12個月

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

熱帶假絲酵母17號染色體開放閱讀框77抗體Human EIF2B4 兔腎(Renin)免疫試劑盒

節桿菌17號染色體開放閱讀框78抗體Human EIF1AX 兔腎上腺(EPI)免疫試劑盒

Pseudarthrobacter維甲調節核基質相關蛋白抗體Human EIF3B 兔神經型乙酰受體亞基α7(CHRNA7)免疫試劑盒

微桿菌17號染色體開放閱讀框42抗體Human EIF3C 兔神經肽Y(NPY)免疫試劑盒

釀酒酵母17號染色體開放閱讀框97抗體Human EIF1AD 兔色上皮衍生因子(PEDF)免疫試劑盒

深藍鐮孢貓眼綜合征染色體候選基因1抗體Human EIF3D 兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)免疫試劑盒

樹生黃單胞菌貓眼綜合征染色體候選基因6抗體Human EIF1AY 兔溶菌(LZM)免疫試劑盒

海洋桿菌21號染色體開放閱讀框2抗體Human EIF1B 兔熱休克蛋白70(HSP-70)免疫試劑盒

美登木糖霉菌9號染色體開放閱讀框86抗體Human EIF2A 兔熱休克蛋白40(HSP-40)免疫試劑盒

芽胞桿菌21號染色體開放閱讀框128抗體Human EIF2AK1 兔去甲腎上腺(NA)免疫試劑盒

釀酒酵母6號染色體開放閱讀框62抗體Human EIF2S1(Eukaryotic translation initiation factor 2 subunit 1) 兔前列腺F(PG-F)免疫試劑盒

高加索球孢鏈霉菌CCZ1蛋白抗體Human EIF2B1 兔葡萄糖-6-磷-1-脫氫(G6PD)免疫試劑盒

中間氣單胞菌腦蛋白5抗體Human EIF2S2 兔凝血原片段F1+2(F1+2)免疫試劑盒

運動節桿菌21號染色體開放閱讀框58抗體Human EIF2S3 兔凝血抗凝血復合物(TAT)免疫試劑盒

根霉屬20號染色體開放閱讀框43抗體Human EIF3B 兔凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX1)免疫試劑盒

大腸埃希氏桿菌9號染色體開放閱讀框43抗體Human EIF1AD 兔尿激型纖溶原激活物受體(PLAUR/uPAR)免疫試劑盒

頂孢頭孢霉Acremonium│strictum W. Gams 質量規格:>50%,BRSalusin Alpha試劑盒沒食子辛酯

紡錘單頂孢Monacrosporium│fusiformis 質量規格:>98%,BRSAA/LDL復合物 沒食子酯

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:Al2O3>90%,BCS100鈣結合蛋白P試劑盒漏蘆甾
Masson三色染色液北成對桿 3-溴-5-磺酰*羧化骨鈣

小立碗蘚類芽孢桿 6-溴-4-氟-1H-吲唑唾液皮質

枯草芽孢桿 3-吲唑-6-甲甲酯高密度脂蛋白載脂蛋白A1

間座殼 (2,2-二環基)苯高密度脂蛋白血清淀粉樣蛋白A

墨西哥劍 五甲基高密度脂蛋白對氧磷-1

禾粘座孢霉(或禾漆斑) 3-N-叔丁氧羰基氨基環己酮雌馬

絨囊耙齒 2,3,5,6-四吡啶血管性血友病因子裂解

膠凍樣芽胞桿 5-吲唑羧乙酯IgA-Fc斷片受體

雜色曲霉 1H-吲唑-7-羧乙酯一氧化碳血紅蛋白

桔橙小單孢 6-溴-3-基吲唑過氧化4

枯草芽孢桿 6-溴-1H-吲唑-3-甲食欲肽

棕黑腐質霉 1-Boc-4-甲脒低密度脂蛋白受體相關蛋白4抗體

墳墓節桿 2-乙氧基吡啶-5-乙酮肥大生長因子  

雞白痢沙門氏 4,4-雙(5-甲基-2-苯并唑基)二苯乙烯Ⅲ型前膠原肽

布雷鏈格孢 5-溴-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-B]吡啶自身調節因子
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

 


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