當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TIDUA人αL艾杜糖苷酸酶ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術咨詢服務!
產(chǎn)品名稱 | IDUA人αL艾杜糖苷酸酶ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human α-L-iduronidase, IDUA Elisa Kit |
貨號 | FS-H63889 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
二氨荃庚二別名: 2,6-二氨基庚二英文名稱: 2,6-Diaminopimelic acid: 583-93-7分子式: C7H14N2O4
原卟啉化鈷英文名稱: Co(III) Protoporphyrin IX chloride: 102601-60-5單位: 瓶貨期: 2-3天
二十烷別名: 二十烷;正二十烷英文名稱: Eicosane: 112-95-8分子式: C20H42
5(6)-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯別名: 5(6)-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯英文名稱: 5(6)-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide esr: 117548-22-8分子式: C25H15NO9
蜂蠟別名: 蜜蠟;中國蠟;蟲蠟;川蠟;黃蠟英文名稱: Bees wax,whi: 8012-89-3儲存條件: RT
化鈣溶液(1mol/L)儲存條件: RT,有效期6個月檸檬鈣四水物別名: 枸櫞鈣;2-羥基-1,2,3-丙三羧鈣鹽英文名稱: CalClum Cltra trahydra: 5785-44-4分子式: C12H10Ca3O14·4H2O
芐基三基化磷(BPP)有效期: 2年別名: 三基芐基化膦;磷鹽“P”英文名稱: Benzyltriphenylphosphonium chloride: 1100-88-5
IDUA人αL艾杜糖苷酸酶ELISA試劑盒實驗原理AE3/FITC 熒光素標記陰離子交換蛋白3抗體IgG錨蛋白重復結(jié)構域蛋白40抗體3,5-雙(基)苯甲Mouse K2 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 2) ELISA Kit
AEV/FITC 熒光素標記禽腦脊髓炎病抗體IgG凋亡抑制因子5抗體[雙(三乙酰氧基)]苯Mouse K3 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 3) ELISA Kit
AEBP1/FITC 熒光素標記脂肪增強結(jié)合蛋白1抗體IgG水通道蛋白-3抗體[雙(三乙酰氧基)]苯Mouse NT-4 (Neurotrophin 4) ELISA Kit
AF6/Afadin/FITC 熒光素標記兔抗人、大、鼠絲狀肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體IgG載脂蛋白D抗體3,5-二溴Mouse NAP3 (Neutrophil Activating Protein 3) ELISA Kit
phospho-Afadin(Ser1718) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、鼠磷化絲狀肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體IgG丁酰基輔酶A合成酶3抗體3,5-二Mouse NAP-2 (Neutrophil Activating Protein-2) ELISA Kit
AGER/RAGE /FITC 熒光素標記晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體IgG脂肪源性亮氨氨基肽酶抗體(血管內(nèi)皮生長因子誘導蛋白)2,5-二苯酚Mouse NGAL (Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin) ELISA Kit
AGEs/FITC 熒光素標記晚期糖基化終末產(chǎn)物抗體IgG線粒體凋亡誘導因子2抗體2,5-二苯酚Mouse NOX1 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1) ELISA Kit
AGER/RAGE/Cy3 熒光素Cy3標記晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體IgGABL2蛋白抗體3,4-二苯酚Mouse NOX4 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 4) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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