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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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Cx內(nèi)切β1,4葡聚糖酶檢測試劑盒微量法

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更新時(shí)間:2022-04-12 09:45:35瀏覽次數(shù):276次

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貨號(hào) FS-01S63659
Cx內(nèi)切β1,4葡聚糖酶檢測試劑盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:銀杏GA17:1:111047-30-4
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阿拉伯糖:147-81-9

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公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒,質(zhì)量信得過產(chǎn)品,售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位,竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱:Cx內(nèi)切β1,4葡聚糖酶檢測試劑盒微量法

規(guī)格:100管/48樣

檢測方法:微量法

貨號(hào):FS-01S63659

商品介紹:

測定意義

Cx存在于細(xì)菌、真菌和動(dòng)物體內(nèi),是纖維素酶系的組份之一,Cx主要作用于非晶態(tài)纖維素和水溶性纖維素衍生物,隨機(jī)水解糖苷鍵,將其分解成葡萄糖、纖維二糖、纖維三糖和其他寡聚體。

測定原理:

采用3,5-二硝基水楊酸法測定Cx催化羧甲基纖維素鈉降解產(chǎn)生的還原糖的含量。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、水浴鍋、離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。

粗酶液提取:

1、細(xì)胞或組織樣品的制備:

培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
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鳥苷環(huán)化激活因子2B(GUCA2B)聯(lián)免疫試劑盒 馬褂木炭疽盤孢TEAD1 (D9X2L) Rabbit mAb

顆粒K(GZMK)聯(lián)免疫試劑盒 阿姆斯特丹曲霉ATP2A1/SERCA1 (D54G12) Rabbit mAb

花生四烯脂加氧3(ALOXE3)聯(lián)免疫試劑盒 蒙氏假單胞CUEDC2 Antibody

P450家族成員26A1(CYP26A1)聯(lián)免疫試劑盒 糙皮側(cè)耳FXR1 (D10A2) XP® Rabbit mAb

血紅蛋白(HB)聯(lián)免疫試劑盒暗產(chǎn)色鏈霉FXR1 (D10A2) XP® Rabbit mAb

全色C合(HCCS)聯(lián)免疫試劑盒 枯草芽孢桿PKR (D7F7) Rabbit mAb

/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激IIα(CAMK2α)聯(lián)免疫試劑盒波羅的海萊茵海默氏PhosphoPlus® Chk2 (Thr68) Antibody Duet

Bcl2關(guān)聯(lián)永生基因3(BAG3)聯(lián)免疫試劑盒擬莖點(diǎn)霉Pontin/RUVBL1 Antibody

芳基硫酯B(ARSB)聯(lián)免疫試劑盒  大腸埃希氏桿APC2 Antibody

組豐富糖蛋白(HRG)聯(lián)免疫試劑盒 副豬嗜血桿Phospho-Chk1 (Ser317) (D12H3) XP® Rabbit mAb

硫乙酰肝蛋白多糖(HSPG)聯(lián)免疫試劑盒貪噬屬Phospho-Chk1 (Ser317) (D12H3) XP® Rabbit mAb

膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5 )聯(lián)免疫試劑盒  枯草芽孢桿CIN85 (D1A4) Rabbit mAb

HtrA絲肽1(HTRA1)聯(lián)免疫試劑盒釀酒酵母Thap11/Ronin Antibody

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