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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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六胺銀染色液(改良Grocott-橙黃G法)

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-16 16:20:05瀏覽次數(shù):199次

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貨號(hào) FS-X10148
六胺銀染色液(改良Grocott-橙黃G法)正在熱銷的產(chǎn)品:CGRP/FITC 熒光標(biāo)記降鈣因相關(guān)肽抗體IgG2-酯 98%
ChAT/FITC 熒光標(biāo)記ChAT抗體IgG3- 98%
CHK1/FITC 熒光標(biāo)記抗周期檢測(cè)點(diǎn)激1抗體IgG三 98%
CHK2/Cds1 /FITC 熒光標(biāo)記抗周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體IgG熔點(diǎn)管
Phospho-CHK2 (Thr68)/FITC 熒光標(biāo)記化周

產(chǎn)品介紹:

用途:

用于真菌(馬爾尼菲青霉菌)和卡氏肺囊蟲類生物的染色

注意事項(xiàng):

固定,石蠟包埋。真菌、肺囊蟲、黑色素染為棕黑色或黑色,背景為橙黃色。

儲(chǔ)存條件:4℃,避光,6個(gè)月

中文名稱:六胺銀染色液(改良Grocott-橙黃G法)

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:5×50ml

貨號(hào):FS-X10148

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

葡萄汁有孢漢遜酵母FAM151A蛋白抗體Human B3GAT1 (Galactosylgalactosylxylosylprotein 3-beta-glucuronosyltransferase 1) 牛N端前腦鈉(NT-proBNP)免疫試劑盒

復(fù)輪生小克銀漢霉跨膜蛋白29抗體Human BCO1 (Beta,beta-carotene 15,15′-dioxygenase) 牛D-乳免疫試劑盒

廣島鏈霉菌FAM154A蛋白抗體Human BTRC (F-box/WD repeat-containing protein 1A) 牛C肽(C-Peptide)免疫試劑盒

釀酒酵母FAM155A蛋白抗體Human BFAR (Bifunctional apoptosis regulator) 牛C反應(yīng)蛋白(CRP)免疫試劑盒

尖孢鐮孢FAM164B蛋白抗體Human BOK (Bcl-2-related ovarian killer protein) 牛5羥色/血清/血清(5HT/ST)免疫試劑盒

平菇FRMD3蛋白抗體Human BRAP (BRCA1-associated protein) 牛Ⅲ型前膠原基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒

密歇根棍狀桿菌標(biāo)記亞種FRMD4B蛋白抗體Human BCAR3 (Breast cancer anti-estrogen resistance protein 3) 牛1-磷脂酰肌-4,5 - 二磷磷二酯ζ1(PLCZ1)免疫試劑盒

戊糖片球菌FRMD7蛋白抗體Human BMPR1B (Bone morphogenetic protein receptor type-1B) 牛17羥孕(17-OHP)免疫試劑盒

Priceomyces sp.FRMD4A蛋白抗體Human P2RX7(P2X purinoceptor 7) 牛1,25二羥基維生D3(1,25 DHVD3)免疫試劑盒

阿姆斯特丹曲霉延胡索酰乙酰乙水解抗體Human BFSP1 (Filensin) 綿羊

枯草芽孢桿菌枯草亞種FAM101A蛋白抗體Human BSCL2 (Seipin) 綿羊組(HIS)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌FAM102B蛋白抗體Human ATG9B (Autophagy-related protein 9B) 綿羊腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒

黑曲霉FAM104B蛋白抗體Human BRI3BP (BRI3-binding protein) 綿羊中性粒明膠相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)免疫試劑盒

谷棒桿菌腎癌下調(diào)蛋白1抗體Human ATP2A1 (Sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase 1) 綿羊脂聯(lián)(ADIPOQ)免疫試劑盒

*百脈根根瘤菌8/第八/第八因子相關(guān)抗原抗體Human ABCA4 (Retinal-specific ATP-binding cassette transporter) 綿羊孕受體(PGR)免疫試劑盒

托湖萊茵海默氏菌胎盤葉受體蛋白2抗體Human ABCB11 (Bile salt export pump) 綿羊孕激/孕(PROG)免疫試劑盒

地衣芽胞桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC, ≥99.5% (GC)牛血清白蛋白V

鹽田菌Salinicola│sp. 質(zhì)量規(guī)格:analytical standard,≥99.5%(GC)牛磺膽鈉

#多主殼菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質(zhì)量規(guī)格:GC,>99.5%(GC)
六胺銀染色液(改良Grocott-橙黃G法)惡臭假單胞 2-氟半胱蛋白抑制劑;胱抑C

桃色枝頂孢 4-氟天冬蛋白抑制劑

橘色硬皮馬勃 3-氟S1核

Escherichia 吲唑-3-羧刀豆A

馬克斯克魯維酵母 2--4,6-二甲基嘧啶雌二

磚紅鐮孢 2-氟苯甲基溴孕酮

豬鏈球 2,4,5-三氟環(huán)腺二磷核糖

花蓋紅菇 5-氟脫鎂葉綠a氧化

膠質(zhì)肉座 (甲氧基)二苯基磷氧谷轉(zhuǎn)氨

根瘤 甲硫基乙乙酯葡聚糖

阪崎腸桿 2-氟羧甲基賴

細(xì)鏈格孢 2-環(huán)己基乙多聚半乳糖

木生假絲酵母 2,3-二氫-1,4-苯并二烷-5-羧二烯氧化物環(huán)化

釀酒酵母 3-(4-嗎啉)-1-l2一氧一植物二烯還原

Glaciihabitans 2-氟-6-髓過(guò)氧化物

 


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