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產氣莢膜梭菌核酸檢測試劑盒

參  考  價面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號50T

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-05-08 10:18:48瀏覽次數:123次

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產氣莢膜梭菌核酸檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

參數規格:
產品名稱:產氣莢膜梭菌核酸檢測試劑盒
產品規格:50T
產品貨號:FS-P9935
產品分類:熒光PCR法
產品運輸:低溫運輸
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產品特點:
本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟 
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
實時熒光定量PCR:
實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的局限,實現了每一輪循環均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據標準曲線獲得定量結果。因此,實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的:
1)Ct值的重現性PCR循環在到達Ct值所在的循環數時,剛剛進入真正的指數擴增期(對數期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現性,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確,重現性*定量方法,已得到的*,廣泛用于基因表達研究、轉基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內切酶消化PCR產物,競爭性模板的產物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產物分開,分別測定熒光強度,根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。
b、內參照法
在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物,內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內標也被擴增。在PCR產物中,由于內標與靶模板的長度不同,二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內標為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物,擴增產物被固相板上特異的探針所結合,再加入抗di高辛或生物素酶標抗體-辣根過氧化物酶結合物,最終酶使底物顯色。常規的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內標,作出標準曲線,也可實現定量檢測目的。
rmIGFBP-3, CF (25 UG)名稱: 中國倉鼠卵巢(亞系克?。?;CHOHu164SCF17 DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)10%FBS

rmIGFBP-2, CF (25 UG)名稱: 小鼠雜交瘤;HBBR96 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmIGFBP-1, CF (25 UG)名稱: 小鼠雜交瘤;HBRP3-12 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmIFN-g, CF (100 UG)名稱: 小鼠雜交瘤;HBBR96 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmIFN-g R1/Fc, CF (100 UG)名稱: 小鼠雜交瘤;HB8H7A RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmIFN-g Biot Aff Pur PAb (50 UG)名稱: 小鼠雜交瘤;HB4G12-13 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmIFN-g Aff Pur PAb (100 UG)名稱: 小鼠雜交瘤;HB1R10F11 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmIFN-g (100 UG)名稱: 小鼠雜交瘤;HB12R13D7 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmIFN-b, CF (100000 UN)名稱: 小鼠雜交瘤;HB11R2F8 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmIFN-b (100000 UN)名稱: 小鼠雜交瘤;HBBADCPPF1-28A RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmIFN-a4 (100000 UN)名稱: 小鼠雜交瘤;HBBADCPPF1-75A RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmIFN-a13 (100000 UN)名稱: 小鼠雜交瘤;HBRP3-17 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmIFN-a11 (100000 UN)名稱: 小鼠雜交瘤;HB2G10 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmIFN-a1 (100000 UN)名稱: 小鼠雜交瘤;HBBADCPPF1-63D RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmIFN-a/b R1, CF (50 UG)名稱: 小鼠雜交瘤;HBBADCPPF1-35B RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmIFN-a A (100000 UN)名稱: 小鼠雜交瘤;HBBADCPPF1-151K RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
產氣莢膜梭菌核酸檢測試劑盒人富組蛋白(histatin5)ELISA試劑盒NOELISAKit產品規格:48T/96T。

人顆粒溶素(granulysin)ELISA試劑盒NOELISAKit產品規格:48T/96T。

人抗菌肽(Attacin)ELISA試劑盒NONELISAKit產品規格:48T/96T。

人殺菌肽(cecropin)ELISA試劑盒NOSELISAKit產品規格:48T/96T。

人神經元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA試劑盒NOSELISAKit產品規格:48T/96T。

人美洲商陸素(PWM)ELISA試劑盒NOSELISAKit產品規格:48T/96T。

人纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA試劑盒NOSELISAKit產品規格:48T/96T。

人清道夫受體B(SRB/CD36)ELISA試劑盒NPELISAKit產品規格:48T/96T。
PCR的反應條件:
因擴增片段的大小、反應體積、使用擴增儀器的不同而不同。
◇ 循環次數
根據模板DNA的量以及擴增片段的大小,設定25~30個循環。
如果循環次數太少,擴增量不足;如果循環次數太多,則會出現Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45~68℃之間 (預備實驗可2℃間隔進行)。另外,由于在60~68℃間,也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內設定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時,每kbp大體可設定30秒~1分鐘;當溫度設定在68℃以下時, 時間設定可稍長一些。通常,Anneal溫度太高,有時會得不到擴增產物;Anneal溫度太低時,容易發生非特異性反應。另外,Extension時間太短時,會得不到擴增產物或者會有一些短的非特異性產物優成;而Extension時間太長時,會出現Smear。

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