產品屬于：

產品名稱：小腸成纖維細胞    

產品規(guī)格：5×105

貨號：FS-01X9800

產品類型：原代細胞

單位：T25/瓶

提供細胞鑒定：提供免疫熒光鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）：37

運輸溫度（℃）：常溫

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

小鼠血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠角化細胞內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠活化A(ACV-A)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Activin A,ACV-A ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse anti-Thyroid-Peroxidase antibody,TPO-Ab ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

小鼠腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Brain derived neurotrophic facor,BDNF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠凋亡誘導因子(AIF)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse apoptosis inducing factor,AIF ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Bone morphogenetic protein receptor 1A,BMPR-1A ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠堿性磷(ALP)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse alkaline phosphatase,ALP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠血管生成4(ANG-4)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse Angiopoietin 4,ANG-4 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,BMPR-Ⅱ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse major histocompatibility complex-Ⅲ,MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse E-Cadherin,E-Cad ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠CD30分子(CD30)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Cluster of differentiation 30,CD30 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA試劑盒 英文名稱：Mouse major histocompatibility complex-Ⅱ,MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠嗜粒細胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse eosinophil chemotactic factor,ECF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
小腸成纖維細胞γ-Catenin  γ-連環(huán)/連接蛋白γ抗體規(guī)格: 0.2ml

Thrap3/TRAP150  甲狀腺受體相關蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml

PRMT5  組蛋白精甲基轉移5抗體規(guī)格: 0.2ml

ELL2  聚合延伸因子2抗體規(guī)格: 0.2ml

Escherichka coli K88-K99/ETECK88  豬源產腸毒性大腸桿菌K88-K99抗體規(guī)格: 0.2ml

CSTF2T/CstF-64  細胞分裂相關蛋白CSTF64抗體規(guī)格: 0.2ml

O-GlcNAc transferase  O位N-乙酰葡萄糖OGT抗體規(guī)格: 0.2ml

SAP62  剪接體相關蛋白62抗體規(guī)格: 0.2ml