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原代少突膠質細胞培養體系

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具體成交價以合同協議為準

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品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-18 15:33:18瀏覽次數:158次

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產地 國產 加工定制
適用領域 科研 貨號 FS-01X9950
原代少突膠質細胞培養體系公司正在出售的產品:心室肌細胞規格:5 × 105次方(1ml)
心肌成纖維細胞規格:5 × 105次方(1ml)
心臟微血管內皮細胞規格:5 × 105次方(1ml)

產品屬于:

產品名稱:原代少突膠質細胞培養體系    

產品規格:100ml/500ml

貨號:FS-01X9950

保存溫度(℃):2-8℃/-20℃

運輸溫度(℃):2-8℃/-20℃   

98.jpg 

細胞培養的優點:

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

注意事項:

1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。

2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。

3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。

4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。

6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。

7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 Pitrilysin Metalloproteinase 1 (MP1)加溶金屬蛋白1(MP1)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Matrix Gla Protein (MGP)基質Gla蛋白(MGP)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Osteoclast Stimulating Factor 1 (OSF)破骨細胞刺激因子1(OSF)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Heparin Binding Epidermal Growth Factor Like Growth Factor (HBEGF)肝結合性表皮生長因子(HBEGF)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Ghrelin (GHRL)饑餓(GHRL)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Ghrelin (GHRL)饑餓(GHRL)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Ghrelin (GHRL)饑餓(GHRL)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Delta-Sleep Inducing Peptide (dSIP)δ-促睡眠(δSIP)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Aldosterone Synthase (ALDOS)醛固合(ALDOS)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Toll Like Receptor 9 (TLR9)Toll樣受體9(TLR9)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Angiopoietin 2 (ANGPT2)血管生成2(ANGPT2)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Nucleoporin 210kDa (NUP210)210kDa核孔蛋白(NUP210)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Nucleoporin 210kDa (NUP210)210kDa核孔蛋白(NUP210)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Insulin Autoantibody (IAA)胰島自身抗體(IAA)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Insulin Autoantibody (IAA)胰島自身抗體(IAA)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Oncostatin M Receptor (OSMR)抑瘤M受體(OSMR)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Matrix Metalloproteinase 2 (MMP2)基質金屬蛋白2(MMP2)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T

 Tachykinin Receptor 3 (TACR3)速激受體3(TACR3)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格:48T/96T
原代少突膠質細胞培養體系MtTF1  線粒體轉錄因子1抗體規格: 0.2ml

BarX1  BarX1蛋白抗體規格: 0.2ml

GOLPH2/GP73  高爾基體膜蛋白GP73抗體規格: 0.2ml

phospho-CstF64(Ser83)  磷化細胞分裂相關蛋白CSTF64抗體規格: 0.1ml

TET1/CXXC6  Ten-eleven轉運基因1蛋白抗體規格: 0.2ml

Calcium Sensing Receptor/CaSR  鈣敏感受體1抗體規格: 0.2ml

DNA Polymerase beta  DNA聚合β抗體規格: 0.2ml

STIM1  基質交感分子1抗體規格: 0.2ml

 


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