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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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福爾馬林-EDTA脫鈣液

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-16 14:48:35瀏覽次數(shù):130次

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貨號(hào) FS-X9984
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產(chǎn)品介紹:

用途:

組織脫鈣,螯合脫鈣劑

注意事項(xiàng):

主要由EDTA、福爾馬林等組成。相對(duì)于常規(guī)EDTA脫鈣液,該試劑脫鈣后對(duì)組織結(jié)構(gòu)損害小,但脫鈣速度更慢,。

儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月

中文名稱:福爾馬林-EDTA脫鈣液

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:500ml

貨號(hào):FS-X9984

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

脫硫弧菌脫硫亞種(脫硫微螺菌、脫硫螺菌、脫硫桿菌、脫硫芽孢弧菌、脫硫弧菌)凋亡抑制因子2抗體Human ICAM 5(Intercellular Adhesion Molecule 5) 人胰島淀粉樣多肽(IAPP)免疫試劑盒

松針散斑殼促腎上腺皮質(zhì)激釋放激結(jié)合蛋白抗體Human Spexin 人原激活肽(TAP)免疫試劑盒

菌生假絲酵母3號(hào)染色體開放閱讀框23抗體Human UNC5B(Netrin Receptor UNC5B) 人原Ⅱ(Try-Ⅱ)免疫試劑盒

腫痂鏈霉菌瓜環(huán)肽抗體Human IRS1(Insulin Receptor SubstRate 1) 人(trypsin)免疫試劑盒

光柄滑銹傘分裂核仁蛋白1抗體Human CXCR2(C-X-C chemokine receptor type 2) 人一氧化碳血紅蛋白(HbCO)免疫試劑盒

遼寧類芽孢桿菌鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激4抗體Human CEBPZ(CCAAT/enhancer binding protein zeta) 人一氧化氮(NO)免疫試劑盒

蟻巢傘屬磷化鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激4抗體Human PAP(Plasmin-Antiplasmin Complex) 人葉受體α(FOLR1)免疫試劑盒

大腸埃希菌膠原蛋白4a2亞基抗體Human AURKA(Aurora kinase A) 人葉(FA)免疫試劑盒

運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌CD161c抗體Human TNFSF9(Tumor necrosis factor ligand superfamily member 9) 人氧還原蛋白過氧化物4(PRDX4)免疫試劑盒

釀酒酵母補(bǔ)體C1r鏈多肽抗體Human MKRN3(makorin ring-finger protein 3) 人氧化型(GSSG)免疫試劑盒

東方異擔(dān)子菌毛細(xì)管形態(tài)發(fā)生蛋白1抗體Human OVA(Ovalbumin) 人氧化高密度脂蛋白(Ox-HDL)免疫試劑盒

交鏈孢霉肌鈣集蛋白/收鈣抗體Human a1AGP(total alpha 1-acid glycoprotein) 人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)免疫試劑盒

黃青霉鈣結(jié)合蛋白樣39抗體Human CPB1(Carboxypeptidase B1) 人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)免疫試劑盒

阿孫鏈霉菌癌胚抗原相關(guān)粘附分子3抗體Human NKp46/NCR1(Natural cytotoxicity triggering receptor 1) 人延伸蛋白A(EloA)免疫試劑盒

根霉20號(hào)染色體開放閱讀框31抗體Human NKp44/NCR2(Natural cytotoxicity triggering receptor 2) 人煙酰腺二核磷(NADPH)免疫試劑盒

斜蓋傘成簇相關(guān)蛋白1抗體Human NKp30/NCR3(Natural cytotoxicity triggering receptor 3) 人煙酰腺二核(NAD)免疫試劑盒

匍枝根霉(黑根霉)Rhizopus│stolonifer 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRGTPNRas試劑盒含羞草

短小芽孢桿菌Bacillus│pumilus 質(zhì)量規(guī)格:>96.5%,工業(yè)級(jí)Gremlin-1蛋白試劑盒紅鐮霉-6-O-β-龍膽二糖

海參崴蛋黃色桿菌Vitellibacter│vladivostokensis 質(zhì)量規(guī)格:>97%,工業(yè)級(jí)GDP解離抑制因子2試劑盒胡桃醌
福爾馬林-EDTA脫鈣液植物乳桿 Leptin Fragment 116-130 Amide mouse瘤病IgM抗體

釀酒酵母 Pelitinib胞漿蛋白1

土地芽孢桿 CHIR-99021鈣調(diào)蛋白樣蛋白5

根瘤 M344衰老關(guān)鍵蛋白5

貝酵母 Physalaemin光蛋白聚糖;Lumican蛋白

肇慶曲霉 Laquinimod泛特異性蛋白15

秦氏蜜環(huán) Dapivirine (TMC120)組織相容性復(fù)合體Ⅰ類

煙曲霉 Bradykinin Fragment 1-5組織相容性復(fù)合體Ⅱ類

硬結(jié)節(jié)桿 Bradykinin Fragment 1-7磷化混合系列蛋白激樣結(jié)構(gòu)域

假結(jié)合棒桿 L抗谷受體抗體

檸檬節(jié)桿 Atazanavir Sulfate吡哆-5'-磷氧化

木賊鐮刀 GW9662前表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白B

猴頭99 Benfotiamine蛋白激Cα

日光鹽場(chǎng)喜鹽芽孢桿 Retapamulin蛋白激Cβ

空腸彎曲桿 BardoxoloneSmad同源物5

 


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