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RNA擴增試劑盒

參  考  價面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號48T

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-05-12 16:57:26瀏覽次數:128次

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RNA擴增試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

實時熒光定量PCR:
實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的局限,實現了每一輪循環均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據標準曲線獲得定量結果。因此,實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的:
1)Ct值的重現性PCR循環在到達Ct值所在的循環數時,剛剛進入真正的指數擴增期(對數期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現性,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確,重現性*定量方法,已得到的*,廣泛用于基因表達研究、轉基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。
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參數規格:
產品名稱:RNA擴增試劑盒
產品規格:48T
產品貨號:FS-P10764
產品分類:恒溫擴增法
產品運輸:低溫運輸
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產品特點:
本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟 
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內切酶消化PCR產物,競爭性模板的產物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產物分開,分別測定熒光強度,根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。
b、內參照法
在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物,內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內標也被擴增。在PCR產物中,由于內標與靶模板的長度不同,二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內標為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物,擴增產物被固相板上特異的探針所結合,再加入抗di高辛或生物素酶標抗體-辣根過氧化物酶結合物,最終酶使底物顯色。常規的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內標,作出標準曲線,也可實現定量檢測目的。
PCR的反應條件:
因擴增片段的大小、反應體積、使用擴增儀器的不同而不同。
◇ 循環次數
根據模板DNA的量以及擴增片段的大小,設定25~30個循環。
如果循環次數太少,擴增量不足;如果循環次數太多,則會出現Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45~68℃之間 (預備實驗可2℃間隔進行)。另外,由于在60~68℃間,也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內設定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時,每kbp大體可設定30秒~1分鐘;當溫度設定在68℃以下時, 時間設定可稍長一些。通常,Anneal溫度太高,有時會得不到擴增產物;Anneal溫度太低時,容易發生非特異性反應。另外,Extension時間太短時,會得不到擴增產物或者會有一些短的非特異性產物優成;而Extension時間太長時,會出現Smear。
 -1581℃冰箱凍結;真空冷凍干燥

巴氏蘑菇培養基: 14模式菌株: no子實體提供形式: 斜面培養物安全等級: 1生長條件: 25 定期移植法

中間蒼白桿菌分類、研究,可以用來農田土壤及環境修復微生物制劑。模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: 0002生長條件: 28℃

ISPI-40078daunomycin 及其它蒽環類抗生素模式菌株: no種屬: Streptomyces│coeruleohygroscopicu提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: 0012生長條件: 28℃

鏈霉菌屬菌種環境模式菌株: no鹽土提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: CM0237生長條件: 28C

沙阿霉素鏈霉菌培養基: 0012模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

 Vleermuis90C血清學分型 Canicola schueffneri模式菌株: no種屬: Leptospira│interrogans提供形式: 凍干物安全等級: 2培養基: CM0114生長條件: 37℃

 -1582℃冰箱凍結;真空冷凍干燥

多刺假單胞菌生長條件: 30℃培養基: 2LB培養基提供形式: 凍干物模式菌株: no -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法

異常漢遜酵母異常變種培養基: CM0077釀造白酒。提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法

微小桿菌深海細菌模式菌株: no水樣/深層海水提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: 741生長條件: 28℃

肺炎克雷伯氏菌培養基: 53模式菌株: no污泥提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 30℃ -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法

細黃鏈霉菌發酵產物對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌有抑制作用.模式菌株: no樹根提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: 14生長條件: 28

正青霉屬抗真菌活性,植物鞘氨醇靶點模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: CM0018生長條件: 26C

 -1583℃冰箱凍結;真空冷凍干燥

 HBUM77070模式菌株: no安全等級: 1種屬: Streptomyces│sp.土壤提供形式: 凍干物培養基: 0305生長條件: 28℃

硫阿米卡星,硫丁胺卡那霉素N-cadherin  N-鈣粘附分子抗原TM7SF2/DHCR14A  脫氫膽固還原酶14抗體

硫阿米卡星(標準品)E-cadherin  E-鈣粘附分子抗原TM4SF3  跨膜蛋白4超家族成員3抗體

兩性霉素BNephrin Protein  去氧腎上腺素TM4SF3  TM4SF3蛋白抗體

兩性霉素B(標準品)Neurocan  神經粘蛋白抗原TLX3  T白血病同源盒蛋白3抗體

醋增血壓素NF2/merlin(neurofibromatosis type 2)  2型神經纖維瘤抗原TLS/FUS  粘液樣脂肪肉瘤蛋白FUS1抗體

阿那曲唑NFATc1  活化T核因子1蛋白TLR9/CD289  Toll樣受體9抗體

阿那曲唑(標準品)phospho-NFKB p65 (pSer536) peptide  磷化核因子/磷化k基因結合核因子抗原TLR7  Toll樣受體7抗體

硫安普霉素,硫阿布拉霉素NF-KapBp50(p50 NF-kappa B;p50NFKB)  核因子50/κ基因結合核因子50抗原TLR6/CD286  Toll樣受體6抗體

硫安普霉素(標準品)NGN3(neurogenin 3; Neurog3)  神經元素3抗原TLR5  Toll樣受體5抗體

鹽阿比朵爾NGX6 (nasopharyngeal carcinoma/NPC associated gene 6)  鼻咽癌相關基因6(多肽)TLR4/CD284  Toll樣受體4抗體
RNA擴增試劑盒Daidzein 大豆素,黃豆苷元 質量規格:>98%,BR

D(-)-allo-Threonine D-別蘇氨 質量規格:>98%,BR

Deoxycorticosteroneacetate 醋去氧皮質 質量規格:>98%,BR

Deoxycorticosteroneacetate 醋去氧皮質(標準品) 質量規格:>98%,BR

Tetrahydro-L-Biopterin(dihydrochloride) 四氫生物蝶呤;沙丙蝶呤;(6R)-BH4 質量規格:>98%,BR

Ambrisentan 安倍生坦 質量規格:>98%,BR

Ambrisentan 安倍生坦(標準品) 質量規格:>98%,BR

DronedaroneHCL 鹽決奈達隆 質量規格:>98%,BR

Dronedarone 決奈達隆(標準品) 質量規格:>98%,BR

RanolazineHCl 雷諾嗪 質量規格:>98%,BR

RanolazineHCl 雷諾嗪(標準品) 質量規格:>98%,BR

LercanidipineHCl 樂卡地平鹽鹽 質量規格:>98%,BR

LercanidipineHCl 樂卡地平鹽鹽(標準品) 質量規格:>98%,BR

PromethazineHydrochloride 鹽異丙嗪 質量規格:>98%,BR

Agomelatine 阿戈美拉汀(II型) 質量規格:>98%,BR

 

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