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肉毒桿菌B型(CB-B)核酸檢測試劑盒

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產(chǎn)品型號50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-05-10 13:25:53瀏覽次數(shù):122次

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肉毒桿菌B型(CB-B)核酸檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:肉毒桿菌B型(CB-B)核酸檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品貨號:FS-P10449
產(chǎn)品分類:熒光PCR法
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟 
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
實時熒光定量PCR:
實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據(jù)標準曲線獲得定量結(jié)果。因此,實時熒光定量PCR無需內(nèi)標是建立在兩個基礎(chǔ)之上的:
1)Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,剛剛進入真正的指數(shù)擴增期(對數(shù)期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內(nèi)標法是一種準確的、值得信賴的科學(xué)方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確,重現(xiàn)性*定量方法,已得到的*,廣泛用于基因表達研究、轉(zhuǎn)基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標和引物,內(nèi)標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內(nèi)標也被擴增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標與靶模板的長度不同,二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內(nèi)標為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物,擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針所結(jié)合,再加入抗di高辛或生物素酶標抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內(nèi)標,作出標準曲線,也可實現(xiàn)定量檢測目的。
銅綠假單胞菌培養(yǎng)基: CM0002利用石油產(chǎn)蛋白酶。提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28-30℃ 真空冷凍干燥法

地芽孢桿菌培養(yǎng)基: 859模式菌株: no砂土提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 70℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他

 -619℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥

漆斑菌生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no

土壤短波單胞菌培養(yǎng)基: 0002模式菌株: no活性污泥提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

大麗輪枝霉培養(yǎng)基: 14模式菌株: no根系提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25-27 定期移植法

梭形芽孢桿菌培養(yǎng)基: CM0003模式菌株: no輕馬勃提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 35-37℃ 真空冷凍干燥法

暫無培養(yǎng)基: CM0014模式菌株: no野生諾尼種子內(nèi)提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法

乙鈣不動桿菌生長條件: 37℃培養(yǎng)基: 33提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法

 -620℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥

溶藻弧菌 -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法生長條件: 22℃提供形式: 凍干物;凍結(jié)物模式菌株: no培養(yǎng)基: 820

酵母菌培養(yǎng)基: 0013上海酵母提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

擬莖點霉培養(yǎng)基: 14模式菌株: no葉子提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25 -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;定期移植法

節(jié)桿菌生長條件: 30℃培養(yǎng)基: 0033提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法

短芽孢桿菌 -80℃冰箱凍結(jié)法生長條件: 37℃提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no培養(yǎng)基: 2

大腸埃希菌研究模式菌株: no病料提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 335生長條件: 37

多肽試劑 U  間硝基甲酰  3-(S)-(1-基-1,1-二基甲基)吡咯烷-L-鹽

2--4-基  4-溴-1-胺  5-(2-溴乙基)-2,3-二氫并呋喃

5-基-2,4-二甲酯  4-水楊  (S)-3-羥基吡咯烷鹽鹽

2-溴-3-  2,4-二羥基  (S)-1-基-1,2,3,4-四氫異

Bromobenzene  溴  108-86-1

Hydrazinium hydroxide  水合聯(lián)(50%,80%)  10217-52-4

Span 80  司班80  1338-43-8

1-Propanol  正丙醇  71-23-8

大鼠乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶(CHAT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人信號識別顆粒抗體(SRP)免疫試劑盒 Human signal recognization paicle aibody,SRP ELISA Kit

檸檬合酶(CS)測試盒 可見分光光度法 10管/9樣

Ratmacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISA試劑盒大鼠巨噬炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

humanguanylatenucleotidebindingprotein4,Gbp4ELISA試劑盒人鳥苷結(jié)合蛋白4(Gbp4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit人白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
肉毒桿菌B型(CB-B)核酸檢測試劑盒花椒酚2009-24-7中文別名:花椒素  

英文名:Xanthotoxol  

登錄號:2009-24-7

分子式:C11H6O4

分子量:202.16

分子結(jié)構(gòu):

外觀:無色晶體

規(guī)格:20 mg/支

純度:≥ 98%

用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。

提取來源:傘形科蛇床屬植物蛇床(idium monnieri(L. ) Cusson)的果實

溶解性:可溶于、DMSO等溶劑,不溶于水。

熔點:252~254℃

藥理藥效:具有平喘、祛痰、抗過敏作用,防止糖皮質(zhì)激素引起的骨質(zhì)疏松,鎮(zhèn)痛、耐缺氧、抗心律失常等。

貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光

有效期: 2年
PCR的反應(yīng)條件:
因擴增片段的大小、反應(yīng)體積、使用擴增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴增片段的大小,設(shè)定25~30個循環(huán)。
如果循環(huán)次數(shù)太少,擴增量不足;如果循環(huán)次數(shù)太多,則會出現(xiàn)Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45~68℃之間 (預(yù)備實驗可2℃間隔進行)。另外,由于在60~68℃間,也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時,每kbp大體可設(shè)定30秒~1分鐘;當溫度設(shè)定在68℃以下時, 時間設(shè)定可稍長一些。通常,Anneal溫度太高,有時會得不到擴增產(chǎn)物;Anneal溫度太低時,容易發(fā)生非特異性反應(yīng)。另外,Extension時間太短時,會得不到擴增產(chǎn)物或者會有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成;而Extension時間太長時,會出現(xiàn)Smear。

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