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當前位置:上海撫生實業有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 48T 0.1PCR管小麥內源基因核酸檢測試劑盒

小麥內源基因核酸檢測試劑盒

參  考  價面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號48T 0.1PCR管

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-05-12 17:01:22瀏覽次數:180次

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小麥內源基因核酸檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

參數規格:
產品名稱:小麥內源基因核酸檢測試劑盒
產品規格:48T   0.1PCR管
產品貨號:FS-P10752
產品分類:熒光探針法
產品運輸:低溫運輸
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產品特點:
本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟 
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
實時熒光定量PCR:
實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的局限,實現了每一輪循環均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據標準曲線獲得定量結果。因此,實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的:
1)Ct值的重現性PCR循環在到達Ct值所在的循環數時,剛剛進入真正的指數擴增期(對數期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現性,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確,重現性*定量方法,已得到的*,廣泛用于基因表達研究、轉基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內切酶消化PCR產物,競爭性模板的產物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產物分開,分別測定熒光強度,根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。
b、內參照法
在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物,內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內標也被擴增。在PCR產物中,由于內標與靶模板的長度不同,二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內標為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物,擴增產物被固相板上特異的探針所結合,再加入抗di高辛或生物素酶標抗體-辣根過氧化物酶結合物,最終酶使底物顯色。常規的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內標,作出標準曲線,也可實現定量檢測目的。
中間普氏菌模式菌株: 未知

下水道球菌近海細菌模式菌株: no生物樣/海灘腐海草提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: 471生長條件: 25℃

蠟狀芽孢桿菌培養基: CM0002產蛋白酶提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 37℃ 真空冷凍干燥法;定期移植法

猴頭生長條件: 26培養基: 14提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no 定期移植法

季也蒙畢赤酵母培養基: 821生物活性物質篩選水樣/表層海水提供形式: 斜面培養物模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法

毛柄金錢菌(金針菇)培養基: 0017食用菌提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

 -1559℃冰箱凍結;真空冷凍干燥

細極鏈格孢生長條件: 25培養基: 14提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no 定期移植法

IFO3111培養基: 0091模式菌株: no種屬: Streptomyces│scabiei提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

釀酒酵母培養基: CM0077啤酒菌。提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28℃ -80℃冰箱凍結法

肺炎克雷伯氏菌培養基: 33模式菌株: no污泥提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 30℃ -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法

擬莖點霉培養基: 14模式菌株: no七葉樹干基部提供形式: 斜面培養物安全等級: 1生長條件: 25 定期移植法

暫無極地細菌模式菌株: no沉積物/深灰色沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: 471生長條件: 15℃

 -1560℃冰箱凍結;真空冷凍干燥

短小桿菌屬培養基: CM0033模式菌株: no諾尼葉提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 30℃ -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法

釀酒酵母培養基: CM0013耐溫酒精酵母提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 真空冷凍干燥法

利卡靈-B;利卡靈BIL-18/IGIF(Interleukin-18)  白介素-18/干擾素γ誘導因子TRIB2  MAPK調控蛋白TRB2抗體

肉豆蔻木脂素IL-23R(Interleukin-23 receptor)  白介素-23受體抗原TRIAD3  鋅指蛋白抑制NFκB蛋白抗體

澤瀉B-23醋酯;23-乙酰澤瀉BIL-1 Alpha (Interleukin-1 Alpha )  白介素1α抗原TRH  促甲狀腺素釋放激素抗體

原花青素B2IL-2 (Interleukin-2)Mouse、Ret  白介素2抗原(大、小鼠)TRF2  端粒結合蛋白2抗體

人參皂苷F1IL-2 (Interleukin-2)Human  IL-2抗原(人)TReP132/RAPA  癌抗雌激素抵抗蛋白2抗體

人參皂苷F2IL-23(Interleukin-23)  白介素-23抗原TREML2/TLT2  髓系觸發受體樣轉錄因子2抗體

人參皂苷CKIL-4(Interleukin-4)  白介素4抗原TREML1/TLT1  髓系觸發受體樣轉錄因子1抗體

異鼠李素-3-O-葡萄糖苷IL-4(Interleukin-4)human peptide  白介素4抗原TREM2  髓系觸發受體2抗體

草質素苷IL-5 peptide  白介素5抗原TREM1  髓系觸發受體1抗體

科羅IL-6 (Interleukin-6) Human  白介素6TREM1  髓系觸發受體1抗體
小麥內源基因核酸檢測試劑盒N-Benzylglycine N-芐基甘氨 質量規格:>98%,BC

Zanamivir 扎那米韋 質量規格:>98%,BC

Zanamivir 扎那米韋(標準品) 質量規格:>98%,BC

Doxifluridine/5-Fluoro-5′-deoxyuridine 去氧氟尿苷/5'-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷 質量規格:>98%,BC

Methazolamide 醋甲唑胺 質量規格:>98%,BC

Methazolamide 醋甲唑胺(標準品) 質量規格:>98%,BP

Ziprasidone 齊拉西 質量規格:>98%,BP

Seratrodast 塞曲司特/西拉達司/塞拉司特 質量規格:>98%,BP,BR,可用于細胞培養

Metolazone 美托拉宗 質量規格:>98%,BR

Metolazone 美托拉宗(標準品) 質量規格:>98%,BR

CediranibMaleate 西地尼布馬來鹽 質量規格:>98%,BR

Sitagliptin 西他列汀 質量規格:>98%,BR

Vildagliptin 維達列汀;維格列汀 質量規格:>98%,BR

Vildagliptin 維達列汀;維格列汀(標準品) 質量規格:>98%,BR

Acetylsalicylicacid 鄰乙酰水楊/阿司匹林 質量規格:>98%,BR
PCR的反應條件:
因擴增片段的大小、反應體積、使用擴增儀器的不同而不同。
◇ 循環次數
根據模板DNA的量以及擴增片段的大小,設定25~30個循環。
如果循環次數太少,擴增量不足;如果循環次數太多,則會出現Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45~68℃之間 (預備實驗可2℃間隔進行)。另外,由于在60~68℃間,也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內設定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時,每kbp大體可設定30秒~1分鐘;當溫度設定在68℃以下時, 時間設定可稍長一些。通常,Anneal溫度太高,有時會得不到擴增產物;Anneal溫度太低時,容易發生非特異性反應。另外,Extension時間太短時,會得不到擴增產物或者會有一些短的非特異性產物優成;而Extension時間太長時,會出現Smear。

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