PCR的反應條件：
因擴增片段的大小、反應體積、使用擴增儀器的不同而不同。
◇ 循環次數
根據模板DNA的量以及擴增片段的大小，設定25～30個循環。
如果循環次數太少，擴增量不足；如果循環次數太多，則會出現Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45～68℃之間 (預備實驗可2℃間隔進行)。另外，由于在60～68℃間，也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內設定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時，每kbp大體可設定30秒～1分鐘；當溫度設定在68℃以下時, 時間設定可稍長一些。通常，Anneal溫度太高，有時會得不到擴增產物；Anneal溫度太低時，容易發生非特異性反應。另外，Extension時間太短時，會得不到擴增產物或者會有一些短的非特異性產物優成；而Extension時間太長時，會出現Smear。
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參數規格：
產品名稱：玉米內源基因核酸檢測試劑盒
產品規格：48T  0.1PCR管
產品貨號：FS-P10750
產品分類：熒光探針法
產品運輸：低溫運輸
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產品特點：
本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟 
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）    1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
定量PCR方法：
a、競爭法
選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中，待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增（其中一個引物為熒光標記）。擴增后用內切酶消化PCR產物，競爭性模板的產物被酶解為兩個片段，而待測模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產物分開，分別測定熒光強度，根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。
b、內參照法
在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物，內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記，下游引物不標記。在模板擴增的同時，內標也被擴增。在PCR產物中，由于內標與靶模板的長度不同，二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來，分別測定其熒光強度，以內標為對照定量待檢測模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物，擴增產物被固相板上特異的探針所結合，再加入抗di高辛或生物素酶標抗體－辣根過氧化物酶結合物，最終酶使底物顯色。常規的PCR－ELISA法只是定性實驗，若加入內標，作出標準曲線，也可實現定量檢測目的。
實時熒光定量PCR：
實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的局限，實現了每一輪循環均檢測一次熒光信號的強度，并記錄在電腦軟件之中，通過對每個樣品Ct值的計算，根據標準曲線獲得定量結果。因此，實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的：
1）Ct值的重現性PCR循環在到達Ct值所在的循環數時，剛剛進入真正的指數擴增期（對數期），此時微小誤差尚未放大，因此Ct值的重現性，即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系，可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定，因此，實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確，重現性*定量方法，已得到的*，廣泛用于基因表達研究、轉基因研究，藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。
歐文斯氏弧菌培養基: 471南大西洋細菌沉積物/深海沉積物提供形式: 斜面培養物模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結法；-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法

美極梅奇酵母生長條件: 25℃培養基: 0013提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

嗜中溫海旋菌污染物降解微生物/潛在石油烴類降解菌模式菌株: no水樣/表層海水提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: 821生長條件: 25℃

 -1554℃冰箱凍結；真空冷凍干燥

AS1.217細菌肥料模式菌株: no種屬: Bacillus│megaterium提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: 0002生長條件: 30℃

木霉培養基: 14木霉系統學研究朽木樁提供形式: 斜面培養物模式菌株: no生長條件: 25 定期移植法

蘇云金芽孢桿菌培養基: 266模式菌株: noGrain提供形式: 斜面培養物安全等級: 1生長條件: 28-30℃ 真空冷凍干燥法

ATCCSC-4121FD=NRRL3238發酵pentostatin模式菌株: no種屬: Streptomyces│antibioticus FD. viais提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: CM0012生長條件: 28C

矩圓黑盤孢培養基: 14模式菌株: no枝干病斑提供形式: 斜面培養物安全等級: 1生長條件: 25-27 定期移植法

蛹蟲草生長條件: 25培養基: 14提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no 定期移植法

 -1555℃冰箱凍結；真空冷凍干燥

ATCC35960=CGMCC1.2149=DSM4425=NCIMB13115模式菌株: yes安全等級: 1種屬: Haloferax│denitrificansSaltern提供形式: 凍干物模式菌株培養基: 0212

植物乳桿菌發酵面制品。模式菌株: no面團提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: CM0006生長條件: 30℃

巴氏醋桿菌培養基: CM0745釀造食醋。提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 30℃ 真空冷凍干燥法；定期移植法

糙皮側耳(平菇)培養基: 0014食用、藥用提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結法；礦物油法；定期移植法

氧化微桿菌培養基: 1003生物活性微生物/潛在的抗腫瘤活性沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結法；-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法

花椒素Iba-1(Ionized calcium bindingadaptor molecule-1)  離子鈣接頭蛋白抗原TRIP  腫瘤壞死因子受體相互作用蛋白抗體

白花前胡IFABP(Intestinal Fatty acid binding protein)  小腸型脂肪結合蛋白抗原Triosephosphate isomerase  磷糖異構酶抗體

佛手柑內酯，香柑內酯，5-甲氧基補骨脂素IFITM1 (interferon induced transmembrane protein 1)  干擾素誘導跨膜蛋白1抗原TRIM7/RNF90  糖原生成素相互作用蛋白抗體

左旋肉堿human IFN- Alpha (Interferon Alpha )  干擾素-α抗原（人）TRIM6/RNF89  環指蛋白89

矢車菊素-3-O-葡萄糖苷；花青素IFNGR1/CD119 peptide  干擾素-gamma受體1抗原TRIM5α/RNF88  環指蛋白88抗體

矢車菊素：花青素IGFBP-2 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2)  胰島素樣生長因子結合蛋白-2（多肽）TRIM50  TRIM50蛋白抗體

5-羥色胺5-HTPIGFBP-3 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 3)C-term  胰島素樣生長因子結合蛋白-3抗原TRIM47  星形瘤高表達蛋白抗體（環指蛋白100）

亥茅酚苷IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3)  胰島素樣生長因子2 mRNA 結合蛋白3抗原TRIM41  環指蛋白調節蛋白激酶C蛋白抗體

異鼠李素-3-O-新橙皮苷IKB Beta (Inhibitor of KB)  KB抑制蛋白β(多肽)TRIM36/RNF98  環指蛋白98抗體

紫蓳靈; 紫堇靈堿IKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha)  KB抑制蛋白α抗原TRIM35  TRIM35蛋白抗體
玉米內源基因核酸檢測試劑盒Loxoprofensodium　洛索洛芬鈉(標準品)　質量規格：>98%,BC

Paeonol　丹皮酚　質量規格：>98%,BC

Paeonol　丹皮酚(標準品)　質量規格：>98%,BC

Rotundine/L-Tetrahydropalmatine　羅通定/左旋延胡索乙素/左旋四氫巴馬汀　質量規格：>98%,BC

Liranaftate　利拉萘酯　質量規格：>98%,BC

Liranaftate　利拉萘酯(標準品)　質量規格：>98%,BC

Naproxensodium　萘普生鈉　質量規格：>98%,BC

Naproxensodium　萘普生鈉（標準品）　質量規格：>98%,BC

Zidovudine　齊多夫定　質量規格：>98%,BC

Zidovudine　齊多夫定（標準品）　質量規格：>98%,BC

Nicorandil　尼可地爾　質量規格：>98%,BC

Nicorandil　尼可地爾（標準品）　質量規格：>98%,BC

Nicotinicacid　煙　質量規格：>98%,BC

Rifampicin　利福平；利發霉素　質量規格：>98%,BC

Rifampicin　利福平(標準品)　質量規格：>98%,BC