ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢(xún)服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類(lèi)型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
磷化D酪氨激酶衰減蛋白2抗體Anti-CDC42/FITC  熒光素標(biāo)記分化周期CDC42蛋白抗體IgG氫化鈣(98.5% metals basis(去除Mg), Mg <1%)微管關(guān)聯(lián)蛋白τ(MAPτ)ELISA試劑盒

磷化D酪氨激酶衰減蛋白2抗體Anti-Phospho-CDC42 (Ser71) /FITC  熒光素標(biāo)記磷化分化周期CDC42蛋白抗體IgG對(duì)硝氯標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.00mg/ml,體：)微管關(guān)聯(lián)蛋白R(shí)P/EB家族成員1(MAPRE1)ELISA試劑盒

膀胱癌缺失因1Anti-Jagged1/CD339 /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠Jagged1/CD339抗體IgG對(duì)硝氯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析)微管關(guān)聯(lián)蛋白6(MAP6)ELISA試劑盒

磷化膀胱癌缺失因1抗體Anti-CDK1/FITC  熒光素標(biāo)記周期素依賴(lài)性激酶1抗體IgG環(huán)戊酮(標(biāo)準(zhǔn)品)微管關(guān)聯(lián)蛋白4(MAP4)ELISA試劑盒

多巴受體D4抗體Anti-CDK2/FITC  熒光素標(biāo)記周期素依賴(lài)性激酶2抗體IgG氯代正烷(標(biāo)準(zhǔn)品)微管關(guān)聯(lián)蛋白2(MAP2)ELISA試劑盒

橋粒斑蛋白1抗體Anti-CDK3 /FITC  熒光素標(biāo)記周期素依賴(lài)性激酶3抗體IgG(標(biāo)準(zhǔn)品)微管關(guān)聯(lián)蛋白1輕鏈3α(MAP1LC3α)ELISA試劑盒

橋粒斑蛋白2抗體Anti-CDK4/FITC  熒光素標(biāo)記周期素依賴(lài)性激酶4抗體IgG標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=3%,體:酮)微管蛋白ε(TUBε)ELISA試劑盒

多巴受體D5抗體Anti-CDK5/FITC  熒光素標(biāo)記周期素依賴(lài)性激酶5抗體IgG死蜱(標(biāo)準(zhǔn)品)微管蛋白δ(TUBδ)ELISA試劑盒

脫氧尿嘧啶三磷核苷水解酶抗體Anti-CDK6/FITC  熒光素標(biāo)記周期素依賴(lài)性激酶6抗體IgG死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6～3%,酮)微管蛋白γ2(TUBγ2)ELISA試劑盒

多巴受體D3抗體Anti-CDK7/Cyclin H/MAT1 /FITC  熒光素標(biāo)記周期素依賴(lài)性激酶7抗體IgG高效氯氟菊酯(標(biāo)準(zhǔn)品)微管蛋白γ1(TUBγ1)ELISA試劑盒

誘捕受體3抗體Anti-CDK8/FITC  熒光素標(biāo)記周期素依賴(lài)性激酶8抗體IgG高效氯氟菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%,體:石油)微管蛋白β6(TUBβ6)ELISA試劑盒

多巴轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白DAT抗體Anti-CDK9/FITC  熒光素標(biāo)記周期素依賴(lài)性激酶9抗體IgG高效氟氯菊酯(標(biāo)準(zhǔn)品)微管蛋白β4(TUBβ4)ELISA試劑盒

誘捕受體2抗體Anti-Phospho-CDK9 (Thr186) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷化周期素依賴(lài)性激酶9抗體IgG氟氯菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%,體：正己烷)微管蛋白β3(TUBβ3)ELISA試劑盒

腫瘤調(diào)亡素/死亡受體5抗體Anti-CD133/RBITC  紅色熒光素羅丹明 (RBITC)標(biāo)記兔抗人、大、小鼠和果蠅CD133抗體IgG氟氯菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=5%,體：正己烷)微管蛋白β1(TUBβ1)ELISA試劑盒

 核心蛋白聚糖抗體Anti-CD46/RBITC  紅色熒光素羅丹明(RBITC)標(biāo)記CD46膜輔蛋白抗體IgG氯菊酯(標(biāo)準(zhǔn)品)微管蛋白β(TUBβ)ELISA試劑盒
維生素D3ELISA試劑盒Anti-CA4 Antibody熱帶假絲酵母拉丁屬名: Candida  tropicalis

Anti-CA3 Antibody(PB1104)鴨疫里氏桿菌拉丁屬名: anatipestifer

Anti-CAA1C Antibody(PB0394)松針散斑殼拉丁屬名: Lophodermium pinastri

Anti-CA4 Antibody根瘤菌用途: 固氮

Anti-CAA2D2 Antibody威爾酵母拉丁屬名: Saccharomyces  willianus

Anti-CACYBP Antibody謝瓦散囊菌拉丁屬名: Eurotium chevalieri

Anti-CAA1D Antibody(PB0286)小克銀漢霉C0注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

Anti-CAD Antibody植物乳桿菌拉丁屬名: Lactobacillus  plantarum

Anti-CACYBP Antibody魚(yú)乳桿菌拉丁屬名: Lactobacillus  acidipiscis

Anti-CALB2 Antibody卷枝毛霉卷枝變型拉丁屬名: Mucor circinelloides f. circinelloides
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿(mǎn)板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)