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貨號	FS-X9760

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：姬姆薩染色液(吉姆薩染液)

英文名稱：Giemsa Staining Solution

產品規格：250mL

貨號：FS-X9760

產品介紹:

本產品由溶液A(Giemsa Stain 儲存液,10×)和溶液B(磷酸鹽緩沖液)組成,溶液A：溶液B=1：9混合成工作液后使用；亦可以分開使用,即先用Giemsa Stain染色,再經磷酸鹽緩沖液處理,亦可以得到滿意的染色效果。

姬姆薩色素(又稱吉姆薩色素)是由天青Ⅱ與伊紅混合而成,Giemsa染色原理和結果與瑞氏染色基本相同,姬姆薩染色液對胞漿著色力較強,能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度,特別是對血液和骨髓細胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜堿性顆粒,著色清晰,但是對胞核著色偏深,核結構顯色不佳,故姬姆薩染液常與瑞氏染液聯合使用。本產品以進口的姬姆薩色素、甲醇為主要原料,含本公司*襯染劑,經研磨配制而成,能呈現出清晰的細胞染色效果,經常用于組織切片、血液和細胞涂片、細菌、染色體顯帶、原生動物寄生蟲等染色。嗜酸性顆粒為堿性蛋白質,與酸性染料伊紅結合,染粉紅色,稱為嗜酸性物質；細胞核蛋白和淋巴細胞胞漿為酸性,與堿性染料美藍或天青結合,染紫藍色,稱為嗜堿性物質；中性顆粒呈等電狀態與伊紅和美藍均可結合,染淡紫色,稱為中性物質。

儲存條件：常溫運輸,室溫避光保存,有效期一年。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

序列相似家族135成員B(FAM135B)英文名：FAM135B 鈣粘蛋白23抗體包裝1g

嗅4(OLFM4)英文名：OLFM4 色p450 2s1抗體包裝5g

胸腺旁腺(PTMS)英文名：PTMS 角蛋白16抗體包裝100g

胸腺嘧啶核磷化(TP)英文名：TP 半胱蛋白蛋白-6抗體包裝25g

胸腺激活調節趨化因子(TARC)英文名：TARC c-fos抗體包裝5g

胸腺基質淋巴細胞生成(TSLP)英文名：TSLP 9號染色體開放閱讀框23抗體包裝1g

胸腎表達趨化因子(BRAK)英文名：BRAK 9號染色體開放閱讀框25抗體包裝100ml

興奮性基轉運蛋白2(EAAT2)英文名：EAAT2 9號染色體開放閱讀框30抗體包裝25ml

信號7A(SEMA7A)英文名：SEMA7A 9號染色體開放閱讀框37抗體包裝500ml

信號3E(SEMA3E)英文名：SEMA3E 9號染色體開放閱讀框40抗體包裝1g

鋅指同源框蛋白1B(ZFHX1B)英文名：ZFHX1B 9號染色體開放閱讀框41抗體包裝25g

鋅結合α2-糖蛋白1(αZGP1)英文名：αZGP1 9號染色體開放閱讀框5抗體包裝5g

心營養樣細胞因子1(CLCF1)英文名：CLCF1 9號染色體開放閱讀框50抗體包裝100g

心型脂肪結合蛋白(FABP3)英文名：FABP3 9號染色體開放閱讀框57抗體包裝25g

心肌營養1(CT1)英文名：CT1 9號染色體開放閱讀框6抗體包裝500g

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格：>97%,培養級左右不對稱發育因子2試劑盒白喉抗體國家標準品

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格：HPLC>95%,標準品組織因子途徑抑制物-2試劑盒抗狀腺過氧化物抗體

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格：>99%,BR,可用于培養組織因子途徑抑制物試劑盒乙型肝炎病表面抗體（Anti-HBs）
姬姆薩染色液(吉姆薩染液)枯草芽孢桿 2,4-二溴氟苯胎球蛋白A

綠色木霉 3-溴-2-甲氧基-5-硝基吡啶肽聚糖

榛黃假單胞 2-溴-1,4-二苯碳酐2

大腸桿 ,4-二苯碳酐9

釀酒酵母 2,3-二溴-5-硝基吡啶碳酐Ⅵ

大腸埃希氏 3,5-二氟苯羰基化蛋白

鏈霉屬 2-氨基-3-溴-5-硝基吡啶糖聚糖

長枝木霉 L-環己基甘甲酯鹽鹽糖化血紅蛋白A1c

植物乳桿植物亞種 2-氨基-3,4-二氟糖化血清蛋白

美澳型核果褐腐病 1-Boc-哌糖磺基轉移10

短小芽孢桿 2,4,6-基芐糖鏈抗原19-9

Vagococcus sp. 1-Boc-哌糖鏈抗原50

楊樹細盾霉 5-溴戊基乙酯糖皮質受體α

假單胞酞菁鋅糖皮質受體β

竹蓀屬 2--4-溴苯甲糖皮質誘導的TNF受體配體
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)