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大鼠骨肉瘤細胞

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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-18 11:27:52瀏覽次數(shù):136次

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產(chǎn)地 國產(chǎn) 加工定制
適用領(lǐng)域 科研 貨號 FS-01X9729
大鼠骨肉瘤細胞公司正在出售的產(chǎn)品:細胞凍存液 英文名稱:CFM 規(guī)格:50 ml
無血清細胞凍存液 英文名稱:SF-CFM 規(guī)格:50 ml
臺盼藍 英文名稱:TB 規(guī)格:50 ml
磷鹽緩沖注 英文名稱:DPBS 規(guī)格:500 ml

產(chǎn)品屬于:

產(chǎn)品名稱:大鼠骨肉瘤細胞    

產(chǎn)品英文:UMR-106

貨號:FS-01X9729

細胞培養(yǎng)條件:DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)+10%FBS+1%P/S

生長狀態(tài):貼壁生長

產(chǎn)品規(guī)格:1×106

單位:T25/瓶

是否提供細胞STR鑒定:不提供STR鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度(℃)37

運輸溫度(℃):常溫   

98.jpg 

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項:

1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。

2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。

3.嚴(yán)格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。

4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。

6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。

7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

β萘酚(β-Nph)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Beta-naphthol,β-Nph ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人凝聚(CLU)ELISA試劑盒英文名稱:Human clusterin,CLU ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人二磷腺(ADP)ELISA試劑盒英文名稱:Human Adenosine diphosphate,ADP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

5羥基吲哚乙(5-HIAA)ELISA試劑盒英文名稱:Human 5-hydroxyindolacetic acid,5-HIAA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

12羥二十烷四烯(12-HETE)ELISA試劑盒英文名稱:Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid,12-HETE ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人羥(Hyp)ELISA試劑盒英文名稱:Human hydroxyproline,Hyp ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人一氧化氮(NO)ELISA試劑盒英文名稱:Human nitric oxide,NO ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人維生C(VC)ELISA試劑盒英文名稱:Human Vitamin C,VC ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人維生B6(VB6)ELISA試劑盒英文名稱:Human Vitamin B6,VB6 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人可溶性P選擇(sP-selectin)ELISA試劑盒英文名稱:Human soluble P-selectin,sP-selectin ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒英文名稱:Human tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人維生D(VD)ELISA試劑盒英文名稱:Human Vitamin D,VD ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人維生K1(VK1)ELISA試劑盒英文名稱:Human Vitamin K1,VK1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人維生B12(VB12)ELISA試劑盒英文名稱:Human Vitamin B12,VB12 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人維生D3(VD3)ELISA試劑盒英文名稱:Human Vitamin D3,VD3 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人維生D2(VD2)ELISA試劑盒英文名稱:Human Vitamin D2,VD2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人維生E(VE)ELISA試劑盒英文名稱:Human Vitamin E,VE EELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人維生A(VA)ELISA試劑盒英文名稱:Human Vitamin A,VA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
大鼠骨肉瘤細胞DDIT4L  DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄樣蛋白4抗體規(guī)格: 0.2ml

DEAF1/Deformed Epidermal Autoregulatory Factor 1  畸形表皮自調(diào)節(jié)因子1抗體規(guī)格: 0.2ml

EID3  E1A樣分化抑制因子3抗體規(guī)格: 0.2ml

ERCC6L  發(fā)育相關(guān)蛋白ERCC6L抗體(乙致畸因子)規(guī)格: 0.2ml

FAM107A  腎細胞癌下調(diào)蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

FRK/PTK5  胃腸道相關(guān)酪抗體(蛋白酪5)規(guī)格: 0.2ml

GANP  生發(fā)中心相關(guān)核蛋白MCM3抗體規(guī)格: 0.2ml

GIDRP88  生長抑制和分化相關(guān)蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml


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