當前位置:上海撫生實業有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TD2R人多巴胺D2受體ELISA試劑盒實驗原理
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公司“質量是企業是生命之源”,選購優勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等
產品名稱 | D2R人多巴胺D2受體ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human dopamine D2 receptor, D2R Elisa Kit |
貨號 | FS-H63301 |
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Sphingomonastrueperi SphingomonastrueperiSphingomonastrueperi分離基物:土壤,美國安全等級:1模式菌株:2生長條件:28℃ 純度:≥85% (GC)
Lactobacillus curvatus 彎曲乳桿菌Lactobacillus curvatus分離基物:,內蒙古自治區凍干安全等級:1模式菌株:no研究MRS培養基:酪蛋白胨 10.0g, 10.0g,酵母 5.0g,葡萄糖 5.0g,鈉 5.0g,檸檬二銨 2.0g,Tween 80 1.0g,K2HPO4 2.0g,MgSO4.7H2O 0.2g,MnSO4.H2O 0.05g,CaCO3 20.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH6.8。生長條件:37℃,好氧 純度:98%
Cystobacr│minus 孢囊桿菌Cystobacr│minus凍干物安全等級:1模式菌株:no作為粘細菌聚合酶的的基因篩選庫,分析和篩選聚基因的多樣性844生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法 純度:98%
Corallococcuscoralloides 珊瑚狀珊瑚球菌Corallococcuscoralloides分離基物:腐爛的木材和其它植物材料的土壤,南非安全等級:1模式菌株:no169生長條件:30℃ 純度:98%
Sphingomonasjaponica SphingomonasjaponicaSphingomonasjaponica安全等級:1模式菌株:102生長條件:28℃ 純度:98%
Salmonella enrica subsp. enrica 腸沙門氏菌腸炎亞種Salmonella enrica subsp. enrica分離基物:腹瀉患者凍干模式菌株:未知新興傳染病研究,腸道的研究營養肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產生芽孢。生長條件:37℃,好氧存儲條件:凍干管,斜面4℃低溫避光冷藏 純度:98%
Edwardsiella│tarda 遲緩愛德華氏菌Edwardsiella│tarda凍干物安全等級:2研究、質量控制CM0002生長條件:36℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:95%
Massiliatieshanensis MassiliatieshanensisMassiliatieshanensis安全等級:1模式菌株:108生長條件:28-30 純度:95%
D2R人多巴胺D2受體ELISA試劑盒實驗原理Tryptic Soy Broth (Soybean-Casein Digest Medium)人羊膜上皮總RNAN-(5-氨基-2-基)-4-(3-吡基)-2-氨基嘧GAPDH 3-磷甘油醛脫氫酶(人)抗原
胰蛋白大豆瓊脂人滋養層絨毛總RNAN-(5-氨基-2-基)-4-(3-吡基)-2-氨基嘧CXCR3/CD183 peptide 表面趨化因子受體3抗原
Tryptic Soy Agar (Soybean-Casein Digest Agar Medium)人絨毛間葉成纖維總RNAN-(5-氨基-2-基)-4-(3-吡基)-2-氨基嘧GATA-3(GATA binding factor 3) GATA結合蛋白3抗原
馬鈴薯葡萄糖瓊脂人前脂肪-內臟總RNA鹽奈必洛爾GATA-4(GATA binding factor 4) GATA結合蛋白4抗原
Potato Dextrose Agar人前脂肪-皮下總RNAFmoc-N-甲基-L-天冬氨 4-叔丁酯Gax(growth arrest-specific homeobox) 生長終止特異性同源盒基因抗原
磷緩沖液pH7.2人間充質干-骨髓總RNAN-叔丁氧羰基-O-芐基-L-蘇氨GDF8/MSTN(growth differntiation factor 8) 生長分化因子8抗原
Phosphate Buffer, pH 7.2人間充質干-脂肪總RNAN-叔丁氧羰基-O-芐基-L-蘇氨GDNF (Glial cell line-derived neurotrphic factor) 膠質源性神經營養因子抗原
緩沖-蛋白胨溶液pH7.0人間充質干-肝臟總RNAN-叔丁氧羰基-O-芐基-L-蘇氨Gelsolin 凝溶膠蛋白抗原
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