當前位置:上海撫生實業有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T尼帕病毒核酸檢測試劑盒
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
產品名稱 | 分類 | 貨號 |
尼帕病毒核酸檢測試劑盒 | 熒光PCR法 | FS-P10180 |
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術的定量原理:?
擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數是呈指數形式增加的,隨著反應循環數的增加,最終PCR反應不再以指數形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據最終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
金黃色葡萄球菌生長條件: 37℃培養基: CM0051提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no 真空冷凍干燥法
疣孢青霉生長條件: 25℃培養基: 0013提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
蘇云金芽胞桿菌培養基: 0002模式菌株: no1-5cm土壤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1生長條件: 30℃ -80℃冰箱凍結法
暫無培養基: 471海洋細菌水樣/上層海水提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 15℃ 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
香菇培養基: 17模式菌株: no朽木提供形式: 斜面培養物安全等級: 1生長條件: 20℃ 定期移植法
鏈霉菌分類學及微生物藥物學的研究模式菌株: no表面土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: 12生長條件: 28℃
-103℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
CGMCC1.5361=JCM14000模式菌株: yes安全等級: 1種屬: Micrococcus│flavus沉積物/活性污泥提供形式: 斜面培養物模式菌株,用于分類學研究。培養基: 471
大奇異球菌培養基: 49模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 30℃ 真空冷凍干燥法
大腸埃希菌用于科研模式菌株: no死亡雞提供形式: 凍干物安全等級: 2培養基: 335生長條件: 37
黃曲霉生長條件: 28℃培養基: 14提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 定期移植法
白色鏈霉菌培養基: CM0039模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 28C 真空冷凍干燥
香菇培養基: 0017食用菌提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
-104℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
鐮孢屬活性物質,組織蛋白酶B抑制活性模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: CM0038生長條件: 28C
多粘類芽胞桿菌培養基: 0014紅麻、亞麻脫膠,24小時脫膠程度為6提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 33℃ 真空冷凍干燥法;其他
尿素瓊脂(PH7.2)250g生化培養基,細菌脲酶檢測
NTMMedium
TBX 培養基 TBX Agar 1000ml 快速、準確檢測大腸桿菌大腸桿菌培養24小時,顯蘭色
氨基脫羧酶試驗對照培養基250g/瓶細菌的氨基試驗對照incubationmedia氨基脫羧酶試驗對照培養基250g/瓶細菌的氨基試驗對照
Mannitol-Egg-Yolk-PolymyxinAgarBase
D-E中和肉湯 E Neutralizing Broth 250克 經防腐劑或消劑處理的樣品增菌培養
D-E中性瓊脂 E Neutralizing Agar 250克 衛生環境中微生物的分離培養, 消效果測定
M肉湯 M-Broth 250克 牛奶和乳制品中乳菌檢測和增菌培養
BGS瓊脂 BGS Agar 250克 沙門氏菌分離培養
尼帕病毒核酸檢測試劑盒PYG液體培養基規格:維生素K1用途:1ml每支含量
MPC瓊脂培養基規格:250g用途:用于鮮奶菌落總數快速檢測(阻抗法)
羧芐西林藥敏紙片 別名:羧芐青霉素規格:100ug/片,20片/瓶用途:用于藥物體外敏感性試驗
腸道菌增菌肉湯(EE)規格:250g
硅鹽細菌培養基(不含瓊脂)規格:250g用途:用于硅鹽細菌的增菌培養
半乳糖規格:20支詳情介紹
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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