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上海撫生實業有限公司
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甲基紅試劑

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 16:10:50瀏覽次數:187次

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貨號 FS-X10125
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CD6

產品介紹:

用途:

適用于多種細菌的鑒定

注意事項:

甲基紅試劑有效成分為甲基紅,由橘黃色變為紅色則為陽性

儲存條件:室溫,避光,12個月

中文名稱:甲基紅試劑

英文名稱:

產品規格:10ml|50ml

貨號:FS-X10125

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

釀酒酵母烯酰水合1抗體Human SARDH(Sarcosine dehydrogenase, mitochondrial) 犬間粘附分子1(ICAM-1/CD54)免疫試劑盒

大腸埃希菌烯酰水合含結構域蛋白2抗體Human HHAT (Protein-cysteine N-palmitoyltransferase HHAT) 犬維生K1(VK1)免疫試劑盒

德爾布有孢酵母腫瘤壞死因子受體超家族成員EDAR抗體Human GSKIP (GSK3-beta interaction protein) 犬維生E(VE)免疫試劑盒

乳桿菌屬自身抗原EDC4抗體Human GAPVD1 (GTPase-activating protein and VPS9 domain-containing protein 1) 犬維生A(VA)免疫試劑盒

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平滑假絲酵母胚胎外胚層發育蛋白EED抗體Human GVINP1 (Interferon-induced very large GTPase 1) 犬透明質3(HAase 3)免疫試劑盒

松木層孔菌轉錄接頭蛋白EP300抗體Human GARNL3 (GTPase-activating Rap/Ran-GAP domain-like protein 3) 犬透明質2(HAase 2)免疫試劑盒

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中國臺灣幾丁質單胞菌磷化4E結合蛋白1抗體Human COLGALT2 (Procollagen galactosyltransferase 2) 犬松弛肽/松弛(RLN)免疫試劑盒

貝萊斯芽胞桿菌三羥酰脫氫抗體Human GPIHBP1 (Glycosylphosphatidylinositol-anchored high density lipoprotein-binding protein 1) 犬水通道蛋白5(AQP5)免疫試劑盒

*美味牛肝菌限制過度增殖相關蛋白EML4抗體Human GNL3L (Guanine nucleotide-binding protein-like 3-like protein) 犬雙氫睪(DHT)免疫試劑盒

發酵性酵母ETS1相關蛋白2抗體Human GMPR2 (GMP reductase 2) 犬視黃結合蛋白4(RBP-4)免疫試劑盒

亞美尼亞固氮菌EFHA1蛋白抗體Human PIGR(Polymeric Immunoglobulin Receptor/Membrane Secretory Component) 犬生長激(GH)免疫試劑盒

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:藥根堿

嗜熱地芽孢桿菌Geobacillus│thermoleovorans 質量規格:20-60 mesh香草

喜鹽芽胞桿菌Halobacillus│sp. 質量規格:分析標準品,99%香葉木
甲基紅試劑突孢毛殼 磷胍分支也交支鏈淀粉

產黃青霉 5-三氟甲基結合態淀粉合成

大腸埃希 DL-3-氨基丁淀粉分支

季也蒙假絲酵母 性大紅GR可溶性淀粉合成

巴西果小克銀漢霉 己戊酯腺二磷葡萄糖焦磷化

Pseudomonas tremae 4-甲基磺酰苯甲賴氨酰氧化

吉氏根瘤 N-(4-溴丁基)鄰苯二甲酰亞賴氨酰氧化1

洋蔥伯克霍爾德氏 2-甲氧基-1-萘賴氨酰氧化2

出芽短梗霉 正戊基苯賴氨酰氧化3

異常威克漢姆酵母 3-苯氧基-1,2-脫鎂葉綠

大腸埃希氏 4-甲磺酰基溴芐磷甘油激

黑曲霉 (S)-3-羥基丁甲酯BCA蛋白

Cystofilobasidium 4-氨基苯甲酰肼壁性轉化

黑曲霉 2-乙酯色P450羥化

球孢白僵 5-氨基-2-吡啶木質過氧化

 


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