當前位置:上海撫生實業有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TON人骨粘連蛋白ELISA試劑盒實驗原理
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公司“質量是企業是生命之源”,選購優勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等
產品名稱 | ON人骨粘連蛋白ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human osteonectin, ON Elisa Kit |
貨號 | FS-H63756 |
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Fictibacillus│macauensis 澳門假芽孢桿菌Fictibacillus│macauensis分離基物:沉積物/表層沉積物凍干物安全等級:1模式菌株:no1.生物降解;2.生物催化;3.生物活性物質篩選; 4.海洋微生物生態學研究。821生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Bacillus│badius 栗褐芽胞桿菌Bacillus│badius分離基物:沉積物/表層沉積物凍干物安全等級:1模式菌株:no潛在石油烴類降解菌/生物活性物質篩選821生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:≥85%
Bacillus│niacini 煙芽胞桿菌Bacillus│niacini分離基物:沉積物/表層沉積物凍干物安全等級:1模式菌株:no潛在石油烴類降解菌/生物活性物質篩選821生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Salinispora│arenicola 棲沙鹽孢菌Salinispora│arenicola分離基物:沉積物/表層沉積物凍干物安全等級:1模式菌株:no1.生物降解;2.生物催化;3.生物活性物質篩選; 4.海洋微生物生態學研究。821生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Pelagibaca│bermudensis 百慕大公海橄欖菌Pelagibaca│bermudensis分離基物:樣/上層海凍干物安全等級:1模式菌株:no潛在的有機污染物降解菌/分離自石油富集菌群821生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Flavobacrium│sp. 黃桿菌Flavobacrium│sp.分離基物:沉積物/深灰色沉積物凍干物模式菌株:no產酶微生物/產蛋白酶菌株;產酶微生物/蛋白酶821生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:非離子型
Sporosarcina│psychrophila 芽孢八疊球菌(加詞待譯)Sporosarcina│psychrophila分離基物:沉積物/深灰色沉積物凍干物模式菌株:no地細菌821生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:96%
Oceanicola│nanhaiensis 南海海棲菌Oceanicola│nanhaiensis分離基物:樣/上層海凍干物模式菌株:no潛在的有機污染物降解菌/分離自石油富集菌群472生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:96%
ON人骨粘連蛋白ELISA試劑盒實驗原理Phospho-Rb (Ser780) 磷化視網膜母瘤相關蛋白1抗體川續斷皂苷乙2-乙酰基-3-甲基吡Mouse Flt3L (FMS Like Tyrosine Kinase 3 Ligand) ELISA Kit
Phospho-Rb (Ser807/Ser811) 磷化視網膜母瘤相關蛋白1抗體山梔苷甲酯2,3-二甲基喹喔啉Mouse G-CSF (Granulocyte Colony Stimulating Factor) ELISA Kit
Phospho-Rb (Thr821) 磷化視網膜母瘤相關蛋白1抗體表告依春2,3-二甲基喹喔啉Mouse GM-CSF (Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor) ELISA Kit
secretory IgA 分泌型免疫球蛋白A抗體大車前苷6-硝基-2,3-二羥基喹喔啉Mouse IFN-β (Interferon Beta) ELISA Kit
RECK 金屬蛋白酶抑制因子RECK抗體8-O-乙酰山梔苷甲酯6-硝基-2,3-二羥基喹喔啉Mouse IGF-1 (Insulin-like growth factor 1) ELISA Kit
REG4/RELP 再生基因蛋白4抗體水晶蘭苷4-羥基吲哚Mouse IGFBP-3 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 3) ELISA Kit
RELN/Reelin 絡絲蛋白抗體黃杞苷4-羥基吲哚Mouse IL-1α (Interleukin 1 Alpha) ELISA Kit
Rbms3 抑癌基因Rbms3抗體巴豆苷Bradykinin Fragment 1-7Mouse IL-1β (Interleukin 1 Beta) ELISA Kit
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