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當(dāng)前位置：上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>糖代謝系列>> αGALα半乳糖苷酶可見分光光度法
| 貨號(hào) | FS-01S63628 |
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公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過(guò)產(chǎn)品，售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠(chéng)為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。
產(chǎn)品名稱：αGALα半乳糖苷酶可見分光光度法
規(guī)格：50管/24樣
檢測(cè)方法：可見分光光度法
貨號(hào)：FS-01S63628
商品介紹：
測(cè)定意義 α-GAL (EC 3.2.1.22)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，能專一地催化α半乳糖苷鍵的水解，主要參與棉子糖、水蘇糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。α-GAL對(duì)于植物種子的萌發(fā)至關(guān)重要，種子萌發(fā)初期，其催化產(chǎn)生的D-半乳糖通過(guò)糖酵解途徑迅速轉(zhuǎn)化和消耗，為種子的萌發(fā)提供最初的能量來(lái)源，后期則主要參與細(xì)胞壁儲(chǔ)藏多糖水解。 測(cè)定原理： α-GAL分解對(duì)-硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷生成對(duì)-硝基苯，后者在400nm有最大吸收峰，通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算α-GAL活性。 自備用品： 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；
試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
粗酶液提取：
1、細(xì)胞或組織樣品的制備： 培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。 2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。 |
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。 6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。 7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。 |
猴蛋白聚糖(PG)試劑盒Human NUP53 ELISA KitMyc基因相關(guān)X因子抗體
猴膜橋蛋白試劑盒 Human NUDCD3 ELISA Kit凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體
猴骨橋(OPN)試劑盒Human GNRH1(Progonadoliberin-1) ELISA KitNFKB激活蛋白1抗體
猴III型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTX-III)試劑盒 Human NUDT10 ELISA Kit磷化Myc基因相關(guān)X因子抗體
猴集落激因子2受體α (CSF2Rα)試劑盒Human NUDT11(Diphosphoinositol polyphosphate phosphohydrolase 3-beta) ELISA Kit亞甲基四氫葉還原MTHFR抗體
猴鈣周期蛋白結(jié)合蛋白(CACYBP)試劑盒Human NUDT16 ELISA KitMEK1/MAPKK1抗體(N-端)
猴骨成型蛋白1(BMP-1)試劑盒 Human NUDT12 ELISA Kit褪黑受體1B抗體
猴滑行蛋白β(TXLNb)試劑盒Human NUDT19 ELISA Kit多藥耐藥相關(guān)蛋白4抗體
猴速激肽受體3(TACR3)試劑盒Human NUDT2 ELISA Kit多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗體
猴亞甲基四氫葉還原(MTHFR)試劑盒Human NUDT2 ELISA Kit線粒體內(nèi)膜蛋白抗體
猴球蛋白A Fc段受體(FcαR/CD89)試劑盒 Human NUDT16 ELISA Kit基質(zhì)金屬蛋白-8/膠原2抗體
猴雙腎上腺皮質(zhì)樣激1(DCLK1)試劑盒Human NUAK2 ELISA Kit基質(zhì)金屬蛋白11抗體
猴β-黑色(βMSH)試劑盒 Human NUAK2 ELISA Kit基質(zhì)金屬蛋白-12抗體
猴蛋白激C-γ(PKCγ)試劑盒Human NUDT19 ELISA Kit基質(zhì)金屬蛋白-15抗體
猴表皮生長(zhǎng)因子(EGF)試劑盒Human NUB1 ELISA Kit基質(zhì)金屬蛋白-16抗體
αGALα半乳糖苷酶可見分光光度法乙基 AR,98.5% 色C 95%Anti-FGF4/HSTF1/HBGF-4/FITC 熒光標(biāo)記纖維母生長(zhǎng)因子4抗體IgG
乙基 >99.5%(GC)聚烯 熔融指數(shù) 0.5g/10minAnti-FGF5/FITC 熒光標(biāo)記纖維母生長(zhǎng)因子5抗體IgG
草 CP，99.5%聚烯 熔融指數(shù) 4g/10minAnti-KGF/FGF-7/FITC 熒光標(biāo)記角質(zhì)形成生長(zhǎng)因子受體/纖維母生長(zhǎng)因子-7抗體IgG
草 GR，99.8%聚烯 熔融指數(shù) 12g/10minAnti-FGF-8/HBGF-8/FITC 熒光標(biāo)記成纖維生長(zhǎng)因子-8/纖維母生長(zhǎng)因子-8抗體IgG
2-氯煙 98%聚烯 熔融指數(shù) 35g/10minAnti-FGF-13/FITC 熒光標(biāo)記抗纖維母生長(zhǎng)因子-13抗體IgG
1,10-癸二 98%聚烯 熔融指數(shù) 2.2g/10minAnti-FGF-10/FITC 熒光標(biāo)記成纖維生長(zhǎng)因子-10/纖維母生長(zhǎng)因子-10抗體IgG
十二烷二 99%聚烯 熔融指數(shù) 0.3g/10min (1.3 @5kg Anti-bFGF-R/FGFR1/FITC 熒光標(biāo)記纖維母生長(zhǎng)因子受體1抗體IgG
1,2-十六烷二 95%氯化金(III) 水合物 Au ≥48%Anti-PLCG 1/PLC gamma 1/FITC 熒光標(biāo)記磷酯Cγ1抗體IgG
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