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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第8年

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β1,3GAβ1,3葡聚糖酶可見分光光度法

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-04-12 09:08:07瀏覽次數(shù):109次

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貨號(hào) FS-01S63622
β1,3GAβ1,3葡聚糖酶可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:角蛋白19抗體beta Adaptin/AP2/FITC 熒光標(biāo)記銜接蛋白β抗體IgG
角蛋白2抗體 Gamma-Adaptin/FITC 熒光標(biāo)記銜接蛋白γ抗體IgG

商品介紹:

測(cè)定意義

β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷鍵水解。在植物染病或處于其他逆境條件下,可誘導(dǎo)細(xì)胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA活性測(cè)定廣泛應(yīng)用于植物病理和逆境生理研究。

測(cè)定原理:

β-1,3-GA水解昆布多糖,內(nèi)切β-1,3-葡萄糖苷鍵,產(chǎn)生還原末端,通過測(cè)定還原糖生成速率來計(jì)算其酶活性。

自備儀器和用品:

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。

公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒,質(zhì)量信得過產(chǎn)品,售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位,竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱:β1,3GAβ1,3葡聚糖酶可見分光光度法

規(guī)格:50管/24樣

檢測(cè)方法:可見分光光度法

貨號(hào):FS-01S63622
QQ截圖20220307153604.png

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。

粗酶液提取:

1、細(xì)胞或組織樣品的制備:

培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。

猴骨粘連蛋白(ON)聯(lián)免疫試劑盒黑曲霉BATF (D7C5) Rabbit mAb

α乳清蛋白(α-La)聯(lián)免疫試劑盒熱帶假絲酵母QKI Antibody

猴可溶性因子受體(sCKR)聯(lián)免疫試劑盒球孢白僵JMJD2B (D7E6) Rabbit mAb

Slit同源物2(Slit2)聯(lián)免疫試劑盒漆柄小孔LIN28A (D1A1A) XP® Rabbit mAb

XI(F11)聯(lián)免疫試劑盒  血痕韌革L(fēng)IN28A (D1A1A) XP® Rabbit mAb

猴載脂蛋白B(ApoB)聯(lián)免疫試劑盒 梅林青霉Estrogen Receptor α (D8H8) Rabbit mAb

猴肝配蛋白A4 (EFNA4)聯(lián)免疫試劑盒鏈霉Estrogen Receptor α (D8H8) Rabbit mAb

猴趨化樣因子超家族成員6(CKLFSF6)聯(lián)免疫試劑盒聚生殼Acetyl-Histone H4 (Lys5) (D12B3) Rabbit mAb

猴脂肪型脂肪結(jié)合蛋白(FABP4)聯(lián)免疫試劑盒 葡萄座腔Parkinson's Research Antibody Sampler Kit

猴羥化 (PAH)聯(lián)免疫試劑盒粟酒裂殖酵母PKCθ (E1I7Y) Rabbit mAb (PE Conjugate)

猴小表皮粘蛋白(SBEM)聯(lián)免疫試劑盒大腸埃希氏SignalSilence® Rictor siRNA I

猴糖基化磷脂酰肌特異性磷脂D1(GPLD1)聯(lián)免疫試劑盒阿舒假囊酵母PTMScan® Lysine/Arginine Modification Antibody Sampler Kit

猴自身調(diào)節(jié)因子(AIRE)聯(lián)免疫試劑盒干草鞘單胞SignalSilence® LRP6 siRNA I

猴神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG-1)聯(lián)免疫試劑盒杰丁畢赤酵母AMPA Receptor (GluA) Antibody Sampler Kit

猴脂聯(lián)受體1(ADIPOR1)聯(lián)免疫試劑盒 雞樅(雞)CD45 (HI30) Mouse mAb (FITC Conjugate)
β1,3GAβ1,3葡聚糖酶可見分光光度法小鼠小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3Anti-MINK1 Antibody人L1粘附分子(L1CAM/CD171)elisa定量檢測(cè)試劑盒

βAnti-MINK1 Antibody人補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白1(CFHR1)elisa定量檢測(cè)試劑盒

大鼠胞漿型磷脂A2Anti-MINPP1 Antibody人胎盤蛋白14 (PP14)elisa定量檢測(cè)試劑盒

αAnti-MINPP1 Antibody人胎盤蛋白13 (PP13)elisa定量檢測(cè)試劑盒

魚類狀腺原Anti-MKI67 Antibody人糖化白蛋白(GA)elisa定量檢測(cè)試劑盒

兔胰淀Anti-MKI67 Antibody人生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43(GAP43)elisa定量檢測(cè)試劑盒

小鼠小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2Anti-MKNK2 Antibody人生長(zhǎng)分化因子1(GDF1)elisa定量檢測(cè)試劑盒

大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽Anti-MKNK1 Antibody人胎兒血紅蛋白(HBF)elisa定量檢測(cè)試劑盒


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