ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果，可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿，細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
?
樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
Psychrobacr│alimentarius 消化嗜冷桿菌Psychrobacr│alimentarius分離基物:沉積物/深海沉積物凍干物安全等級:1模式菌株:no無機污染物抗性菌/抗重金屬鉻(Cr)471生長條件:4℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%

Citricoccus│sp. 檸檬球菌Citricoccus│sp.分離基物:樣/海斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no大洋細菌471生長條件:4℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%

Planococcus│sp. 動性球菌Planococcus│sp.分離基物:沉積物/深海沉積物凍干物模式菌株:no大洋細菌471生長條件:4-20℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%

Salinibacrium│amurskyense 阿穆斯基灣鹽桿菌Salinibacrium│amurskyense分離基物:沉積物/深海沉積物凍干物模式菌株:no大洋細菌，產(chǎn)酶微生物/ 蛋白酶471生長條件:4-20℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

nacibaculum│aiptasiae 海葵黏著桿菌nacibaculum│aiptasiae分離基物:生物樣/海葵（患病的）凍干物安全等級:1模式菌株:；471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Roseobacr│litoralis 海濱玫瑰桿菌Roseobacr│litoralis分離基物:不詳斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%

Oleispira│lenta 緩慢油螺旋菌Oleispira│lenta分離基物:樣/海凍干物模式菌株:；471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Roseivivax│halotolerans 玫瑰色鮮艷菌（加詞待譯）Roseivivax│halotolerans分離基物:生物樣/附生植物凍干物安全等級:1模式菌株:；生物轉(zhuǎn)化微生物/含有細菌葉綠素；產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)脲酶（Urease）471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%
cGMP人環(huán)磷酸鳥苷ELISA試劑盒實驗原理Phospho-SHIP2 (Ser576)  磷化蛋白酪氨磷酶2抗體淀樣肽前體蛋白抗體（C端）4-(溴甲基)甲甲酯Mouse ATXN1 (Ataxin 1) ELISA Kit

Phospho-SHIP2 (Tyr542)  磷化蛋白酪氨磷酶2抗體腺苷環(huán)化酶2抗體4-(溴甲基)甲甲酯Mouse ATXN2 (Ataxin 2) ELISA Kit

Phospho-SHIP2 (Tyr986/987)  磷化蛋白酪氨磷酶2抗體載脂蛋白C3抗體N(e)-Boc-L-賴氨Mouse ABCA1 (ATP Binding Cassette Transporter A1) ELISA Kit

Phospho-SHIP2 (Tyr580)  磷化蛋白酪氨磷酶2抗體載脂蛋白E4抗體N(e)-Boc-L-賴氨Mouse ABCG1 (ATP Binding Cassette Transporter G1) ELISA Kit

SIAH1  泛素連接酶Siah1抗體自噬相關(guān)基因AMBRA1抗體N(e)-Boc-L-賴氨Mouse ANP (Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit

SIAH2  泛素連接酶Siah2磷化自噬相關(guān)蛋白4C抗體3,3',4,4'-聯(lián)苯四甲二酐Mouse AXIN2 (Axis Inhibition Protein 2) ELISA Kit

SIP1  運動神經(jīng)元存活蛋白結(jié)合蛋白1抗體磷化自噬相關(guān)蛋白4C抗體3,3',4,4'-聯(lián)苯四甲二酐Mouse bFGF/FGF2 (Basic Fibroblast Growth Factor) ELISA Kit

SIRT1  沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體磷化凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體3,3',4,4'-聯(lián)苯四甲二酐Mouse FGF4 (Fibroblast Growth Factor 4) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)