測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線高點的吸光度可接近2.0，繪制時常用半對數(shù)紙，以檢測物的濃度為橫坐標(biāo)，ELSIA試劑盒以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，中央較呈直線的部分是理想的檢測。 VEGT-Delisa試劑盒而非特異IgM由于其在*步溫育中，可與特異IgM競爭與固相抗體結(jié)合，所以會影響測定的靈敏度。因此，使用本法測IgM，必須對臨床樣本進行適當(dāng)稀釋。樣本稀釋后，上述產(chǎn)生干擾作用的非特異IgM含量減少，而特異IgM由于處于相應(yīng)病原體的急染期，滴度很高，一定稀釋后，不會有明顯影響。

VEGT-Delisa試劑盒的分析

1．首先將抗人IgMbt鏈抗體于碳酸鹽緩沖液中40c下過夜包被聚苯乙烯等固相，形成固相抗體，洗滌去除未與固相結(jié)合或結(jié)合不緊的抗體后，用小牛血清或牛血清白蛋白等封閉，洗滌去除未結(jié)合的部分及雜質(zhì)。

2．加入含待測IgM抗體的臨床樣本如血清等，溫育一定時間后洗板；此時，大鼠ELISA試劑盒待測樣本中的IgM抗體就會與固相上的抗P鏈抗體反應(yīng)而吸附于固相上。
3．加入特異的抗原如HAV抗原、HBcAg等，溫育一定時間后洗板；此時，特異抗原就會與固相上的特異IgM抗體發(fā)生反應(yīng)。
4．加入酶標(biāo)記的抗特異抗原的抗體，溫育一定時間后洗板；此時，在固相上即形成相應(yīng)的抗原抗體復(fù)合物。