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家雞胚胎心臟來源細胞培養操作說明

時間:2019/10/25閱讀:319
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                    家雞胚胎心臟來源細胞培養操作說明

秋風,涼絲絲的,吹拂著花草樹木,好像一位溫情的母親正輕輕地哼著催眠曲把自己的子女送進甜蜜的夢鄉。接下為介紹家雞胚胎心臟來源細胞培養操作說明

注意事項:

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養箱內靜置培養過夜,隔天再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們為您再免費寄送一次。

原代培養:

1.取出小鼠后瀝干酒精,放入超凈臺內,固定在泡沫板上。

2.用鑷子提起皮膚,用解剖剪剪開皮膚一個橫切口,將皮膚向上撕開,然后剪開肌肉等,暴露出腹腔,在左側找到脾臟,用彎頭眼科鑷取出脾臟,置于無菌培養皿中。

3.用生理鹽水將取出的脾臟清洗多次,并剔除多余無用的組織。

4.將篩網置于平皿中,脾臟置于篩網上,用彎頭鑷鑷住,輕輕在篩網上進行碾磨,同時不停滴加不含血清的培養液沖洗。

5.將碾磨好的細胞懸液吸入至離心管中,離心(1000rpm,5min),吸去上清(去除血液等)。

6.加入10ml培養液,吹打混勻,取樣計數。

7.將稀釋好的細胞懸液分裝于培養瓶中,輕輕搖晃混勻,在培養瓶上。

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