細胞培養步驟:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。

二. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產品現貨，超低比價，貨期短，價格優，售后齊全。

商品屬性：

細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

大鼠白介素10(IL-10)免疫試劑盒現貨供應

大鼠可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)免疫試劑盒*直銷

鴨極低密度脂蛋白(VLDL)免疫試劑盒進口、分裝

萘啶酮酸 英文名稱：Nalidixic Acid 產品規格：1.5mg/支*5

LEB肉湯 英文名稱：Listeria Enrichment Broth 產品規格：250g

酵母浸粉 英文名稱：Yeast Extract Powder 產品規格：250g

小鼠化酪蛋白激JAK3(pJAK3)免疫試劑盒進口、組裝

小鼠FMS樣酪激

大鼠口腔上皮細胞Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽傳染性支氣管炎病毒流行株RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周DAB2  信號轉導功能磷蛋白DAB2抗體 規格: 0.2mlcIAP1/RNF48  凋亡抑制因子1抗體 規格: 0.2ml

Hamster Leukemia Virus金黃地鼠白血病病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周RNF138  環指蛋白138抗體 規格: 0.2mlDNPK1  DNA依賴蛋白激催化亞基抗體 規格: 0.1ml

Cephalosporium maydis玉米晚枯病PCR試劑盒 植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-CDKN2A/P16 (Ser140)  磷酸化抑基因p16抗體 規格: 0.1mlphospho-APP/ABPP (Ser730)  磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體 規格: 0.1ml

Ostreid Herpesvirus Type 1（OsHV-1）牡蠣皰疹病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用） 50次 低溫 負20度 一年 2-4周GUSB/beta glucuronidase  β葡萄糖醛酸苷抗體 規格: 0.2mlTubulin-Beta  微管蛋白抗體（免疫組化用抗體）Tubulin β 規格: 0.1ml

Ostertagia lyrata豎琴奧斯特線蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Phospho-MLK3(Thr277/Ser281)  磷酸化絲/蘇蛋白激MLK3抗體 規格: 0.1mlMouse Anti-rat IgG/FITC  FITC標記的小鼠抗大鼠IgG 規格: 0.3ml

Bordetella parapertussis副百日咳波氏桿探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周HBEX2/Bex1  腦組織表達X連鎖蛋白1抗體 規格: 0.2mlPBK/TOPK  PDZ連接激/T-LAK細胞源蛋白激抗體 規格: 0.1ml

Ramulus cinnamomi桂枝染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周MMP-2  基質金屬蛋白-2抗體 規格: 0.1mlphospho-NIFK/MKI67IP(Thr234)  磷酸化KI67相互作用蛋白抗體 規格: 0.1ml

Suid Herpesvirus-1(SuHV-1)豬皰疹病毒 I 型LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Goat Anti-Mouse IgM/PE-Cy7  PE-Cy7標記的羊抗小鼠IgM 規格: 0.1mlHCV-NS4a  丙型毒-NS4a抗體 規格: 0.1ml

Human Papillomavirus 18(HPV-18)人瘤病毒18 探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周OLFM3/Optimedin  嗅球蛋白3抗體 規格: 0.2mlVAM1/MPP6  棕櫚酰化膜蛋白6抗體 規格: 0.2ml

Medulla tetrapanacis通草探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周phospho-VEGF receptor 2 (Tyr996)  磷酸化管內皮生因子受體2抗體 規格: 0.1mlProtein A  重組