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實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造，并經過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細胞培養的優點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

大鼠 GFRA1 基因全長ORF克隆

大鼠 GM-CSF 基因全長ORF克隆

大鼠 CNTFR 基因全長ORF克隆

大鼠 FCGR2B / CD32b 基因全長ORF克隆

大鼠 FCGR3A / CD16a 基因全長ORF克隆

大鼠 CD64 / FCGR1 基因全長ORF克隆

大鼠 FCGR2A / CD32a 基因全長ORF克隆

大鼠 CD89 / FCAR 基因全長ORF克隆

大鼠 DLL1 基因全長ORF克隆

大鼠 CNTF 基因全長ORF克隆

NCI-H1650 (非小細胞肺癌細胞) *瓊脂培養基 Complete Agar Medium 250g 0.78-50 ng/mL 人載脂蛋白B(Apo-B)ELISA試劑盒

鹽緩沖液 （PBS pH7.2） Phosphate Buffered Saline 9ml*20支/包 0.312-20 ng/mL 人基質金屬蛋白抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒

2 ug pFastBac HT CAT pFastBac HT CAT 低溫運輸，-20℃保存

50T 犬細小病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人卵泡抑素結合蛋白1(FSTL1)ELISA試劑盒

2 ug pTagCFP-N pTagCFP-N 低溫運輸，-20℃保存鼠李糖發酵管進口、國產鼠李糖發酵管20支BR

100g 三 Trichloroacetic Acid 4℃保存 15.6-1000 pg/mL 人白介素26(IL-26)ELISA試劑盒

600U 等離子體胺氧化 Plasma Amine Oxidase  -20℃保存

5mL 間充質干生長因子-無血淸 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存甲苯胺藍-DNA瓊脂進口、國產Toluidine Blue-O-Dnase Agar100克用于核糖核酸測定

1瓶 MS751株 MS751 低溫運輸和保存 31.2-2000 pg/ml ELISA Kit for Human Trypsin-2

2000U T4 RNA 連接 2 （截短型 K227Q） T4 RNA Ligase 2(truncated K227Q) -20℃保存 0.39-25 ng/mL 人谷脫羧(GAD)ELISA試劑盒

葡萄糖發酵管(軍團菌)  20支 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Radical S-adenosyl methionine domain-containing protein 2

培養操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造，并經過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。