elisa檢測試劑盒使用時需留心的細節(jié)：
（1）不管是試劑盒，還是其它產(chǎn)品，在使用之前都要仔細閱讀說明書，同時確定試劑盒是不是在有效期內(nèi)。
（2）標本制備要規(guī)范，每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備（貯存），盡量分裝做備份，短期內(nèi)無法實驗者，注意低溫保存。
（3）根據(jù)檢測標本數(shù)量確定所需試劑盒的量。
（4）按說明書將所用試劑盒平衡至室溫，配制所需試劑盒，DIY夾心法ELISA常見技術指南。
（5）選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對，若選擇兩個單抗，必須識別不同表位的抗體，從同一家公司選擇抗體。
（6）若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng)，應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
（7）當測定混合液體中的抗原時，如血清，建議在標本稀釋液中加不相干的Ig。
（8）準備好所有實驗額外所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機等。
實驗條件的選擇包括:
（1）固相載體的選擇：不管何種載體，在使用前均可進行篩選，用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
（2）包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好，吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間，吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時，
（3）酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份），然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
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