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小鼠檢測試劑盒標本收集及處理

時間:2021/11/3閱讀:315
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小鼠檢測試劑盒標本的采集與保存:

1、血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置 2 小時或 4oC 過夜,然后 1000×g 離心 20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2、血漿:用 EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的 30 分鐘內(nèi)于 2-8oC 1000×g 離心 15 分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3、組織勻漿:

1)、取適量組織塊,于預(yù)冷 PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);

2)、可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入 5-10mL 預(yù)冷 PBS 進行充分研磨,該過程需在冰上進行(有條件實驗室可選用機器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進一步處理(超聲破碎過程中注意冰浴降溫;反復(fù)凍融法可重復(fù) 2 次)。

3)、將制備好的勻漿液于 5000×g 離心 5 分鐘,留取上清即可檢測。

4、其它生物標本:請 1000×g 離心 20 分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

小鼠檢測試劑盒標本處理:

1、本公司只對試劑盒本身負責(zé),不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責(zé),請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。

2、實驗前應(yīng)預(yù)測標本含量,如果標本濃度過高,應(yīng)對標本進行稀釋,使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標本0.01mol/L 的 PBS 稀釋(PH=7.0-7.2)。

3、若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進行預(yù)實驗驗證其有效性,并注意留存樣本。

4、使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致 ELISA 實驗結(jié)果偏差。

5、若樣本為細胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素 較多,如:細胞狀態(tài)、細胞數(shù)量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。

6、某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。

7、建議使用新鮮樣本,保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實驗結(jié)果偏 差。


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