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細胞培育的操作過程

時間:2021/7/21閱讀:380
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細胞培育的操作過程:

  細胞培養(yǎng)也叫細胞克隆技術,在生物學中的正規(guī)名詞為細胞培養(yǎng)技術。不論對于整個生物工程技術,還是其中之一的生物克隆技術來說,細胞培養(yǎng)都是一個需要的過程,細胞培養(yǎng)本身就是細胞的大規(guī)模克隆。細胞培養(yǎng)技術可以由一個細胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞,這是克隆技術需要的環(huán)節(jié),而且細胞培養(yǎng)本身就是細胞的克隆。通過細胞培養(yǎng)得到大量的細胞或其代謝產(chǎn)物。因為生物產(chǎn)品都是從細胞得來,所以可以說細胞培養(yǎng)技術是生物技術中最核心、最基礎的技術。

一、細胞準備工作 

準備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培育基與其他試劑的制造、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺的清潔與消毒,培育箱及其他儀器的檢查與調(diào)試等。 

二、選材 

在無菌環(huán)境下從機體取出某種安排細胞,通過必定的處理后接入培育器血中,這一進程稱為選材。理論上講各種動物和人體內(nèi)的所有安排都可以用于培育,實際上幼體安排比成年個別的安排簡單培育,分解程度低的安排比分解高的簡單培育,腫瘤安排比正常安排簡單培育。選材后應立即處理,趕快培育,因故不能立刻培育時,可將安排塊切成黃豆般大的小塊,置4℃的培育液中保存。取安排時應嚴厲保持無菌,同時也要避免接觸其他的有害物質(zhì)。取病理安排和皮膚及消化道上皮細胞時簡單帶菌,為減少污染可用抗菌素處理。

三、培育 

將獲得的安排細胞接入培育瓶或培育板中的進程稱為培育。如系安排塊培育,則直接將安排塊接入培育器皿底部,幾個小時后安排塊可貼牢在底部,再加入培育基。如系細胞培育,一般應在接入培育器皿之前進行細胞計數(shù),按要求以必定的量(以每毫升細胞數(shù)表明)接入培育器皿并直接加入培育基。細胞進入培育器皿后,立即放入培育箱中,使細胞盡早進入成長狀態(tài)。
 

一般原代細胞培育進入培育后有一段潛伏期,在潛伏期細胞一般不割裂,但可貼壁和游走。過了潛伏期后細胞進入旺盛的割裂成長期。細胞長滿瓶底后要進行傳代培育,將一瓶中的細胞消化懸浮后分至兩到三瓶繼續(xù)培育。


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