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細胞培育的操作過程

時間:2021/7/21閱讀:378
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細胞培育的操作過程:

  細胞培養也叫細胞克隆技術,在生物學中的正規名詞為細胞培養技術。不論對于整個生物工程技術,還是其中之一的生物克隆技術來說,細胞培養都是一個需要的過程,細胞培養本身就是細胞的大規模克隆。細胞培養技術可以由一個細胞經過大量培養成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞,這是克隆技術需要的環節,而且細胞培養本身就是細胞的克隆。通過細胞培養得到大量的細胞或其代謝產物。因為生物產品都是從細胞得來,所以可以說細胞培養技術是生物技術中最核心、最基礎的技術。

一、細胞準備工作 

準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培育基與其他試劑的制造、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺的清潔與消毒,培育箱及其他儀器的檢查與調試等。 

二、選材 

在無菌環境下從機體取出某種安排細胞,通過必定的處理后接入培育器血中,這一進程稱為選材。理論上講各種動物和人體內的所有安排都可以用于培育,實際上幼體安排比成年個別的安排簡單培育,分解程度低的安排比分解高的簡單培育,腫瘤安排比正常安排簡單培育。選材后應立即處理,趕快培育,因故不能立刻培育時,可將安排塊切成黃豆般大的小塊,置4℃的培育液中保存。取安排時應嚴厲保持無菌,同時也要避免接觸其他的有害物質。取病理安排和皮膚及消化道上皮細胞時簡單帶菌,為減少污染可用抗菌素處理。

三、培育 

將獲得的安排細胞接入培育瓶或培育板中的進程稱為培育。如系安排塊培育,則直接將安排塊接入培育器皿底部,幾個小時后安排塊可貼牢在底部,再加入培育基。如系細胞培育,一般應在接入培育器皿之前進行細胞計數,按要求以必定的量(以每毫升細胞數表明)接入培育器皿并直接加入培育基。細胞進入培育器皿后,立即放入培育箱中,使細胞盡早進入成長狀態。
 

一般原代細胞培育進入培育后有一段潛伏期,在潛伏期細胞一般不割裂,但可貼壁和游走。過了潛伏期后細胞進入旺盛的割裂成長期。細胞長滿瓶底后要進行傳代培育,將一瓶中的細胞消化懸浮后分至兩到三瓶繼續培育。


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