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  • 豚鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒*

豚鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒*

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“豚鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒”公司主營產(chǎn)品有:elisa試劑盒,進(jìn)口生物試劑,標(biāo)準(zhǔn)品,生化試劑,抗體等科研產(chǎn)品。
豚鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒* 產(chǎn)品詳情

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豚鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒*,其他相關(guān)ELISA試劑盒(大鼠、人、豬、雞、鴨、兔、羊...ELISA試劑盒);產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T;試劑盒保存:2-8℃;試劑盒有效期:6個(gè)月;本試劑不同批號組分不得混用;ELISA試劑盒說明書如中文說明書與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn);試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上,2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%。
豚鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒*原理
原理用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、*化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。ELISA的基本原理有三條:(1)抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學(xué)活性;(2)抗原或抗體可通過共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;(3)酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。
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豚鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒*檢測方法用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
  1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
  2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
  3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
  4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
  5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
  6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測O·D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
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