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Ribo-seq

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藍景科信河北生物科技有限公司是一家專業從事生命科學產品和技術開發的公司。本公司擁有雄厚的技術實力,創始團隊均具有博士學位,來自于國內的清華大學、中國農業大學和美國麻省理工學院。公司立足保定,放眼中外,以嚴謹的科學態度,不斷滿足生命科學領域的市場需求。
      公司位于保定的實驗室,專注為國內的高等院校或研究機構提供創新的技術解決方案。尤其是對于分子間相互作用的研究,例如DNA親和純化測序,我們有很高的,客戶有中國農業大學、浙江大學、上海交通大學、中國科學院動物研究所、中國科學院植物研究所等幾十所高等院校或科研機構。公司將在分子間相互作用領域不斷投入,計劃研發更多更具創新的技術服務方案和應用工具,為促進我國生命科學研究領域的發展貢獻力量。
      公司目前處于快速發展期,將持續投入,繼續加大研發力度,與合作伙伴一起為國內外客戶提供優質、專業的生命科學產品。




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核糖體印跡測序(Ribosome profiling, Ribo-seq)檢測正在翻譯的RNA信息,揭示蛋白合成的時間,位置,以及蛋白質合成的調控機制。
Ribo-seq 產品詳情

技術原理

蛋白質是生命活動的主要承擔者,翻譯調控又是細胞內重要的調控方式。翻譯是核糖體讀取mRNA模板來指導蛋白質合成的過程,是基因表達的關鍵步驟。翻譯的過程受到嚴格的調控,很多疾病與翻譯異常相關,比如神經退行性疾病、貧血癥和發育障礙等。雖然核糖體的結構與功能研究的比較透徹,但是對于翻譯過程的調控機理還需要深入研究。

核糖體印跡測序(Ribosome profiling, Ribo-seq),能夠詳細檢測體內的翻譯狀態。Ribo-seq的技術核心是識別與核糖體結合的mRNA以及正在被翻譯的約30個核苷酸。對核糖體結合的mRNA片段進行測序,能夠精確記錄核糖體在翻譯過程中的位置。將轉錄組與Ribo-seq數據聯合分析,可以計算出蛋白質的合成速率。

技術特點

Ribo-seq能夠揭示蛋白合成的時間、地點、位置、哪些蛋白質正在被合成以及蛋白質合成的調控機制。Ribo-seq搭建了從轉錄組學到蛋白質組學之間的橋梁,已經廣泛應用在動物、植物和微生物的研究中,用于揭示生長發育、形態建成、疾病發生、逆境脅迫響應的調控機制。

應用方向

Ribo-seq應用于研究轉錄本的翻譯活性、鑒定翻譯起始位點、ORF位置和蛋白質的翻譯調控機制。

Ribo-seq技術已經廣泛應用在動物、植物和微生物的研究中,用于揭示生長發育、形態建成、疾病發生、逆境脅迫響應的調控機制。總之,Ribo-seq能從基因組水平檢測蛋白質的翻譯狀況,獲得正在翻譯的mRNA序列信息并解析翻譯調控機制。

藍景科信優勢

實驗周期快、質量高、結果穩定可靠。

豐富的物種經驗。

實驗流程

Ribo-seq

分析內容

標準生信分析

(1)原始數據過濾與測序質量評估

(2)比對去除核糖體RNA、tRNA、sRNA等

(3)Reads長度分布統計與長度過濾

(4)比對參考基因組

(5)測序飽和度分析

(6)RF在基因組上的分布統計與分類

(7)三堿基節律分析

(8)翻譯基因統計與表達量分析

(9)樣本關系分析

(10)組間差異翻譯基因分析

(11)差異翻譯基因的GO和KEGG功能富集分析

Ribo-seq與RNA-seq的聯合分析

(1)翻譯效率計算

(2)翻譯效率與轉錄水平的關系分析

(3)翻譯效率與轉錄水平的關聯分析

分析流程

實驗案例

Ribo-seq

Ribo-seq

Ribo-seq


送樣要求

(1)細胞樣本:建議送樣量5×106-1×107個。

(2)動物組織樣本:建議送樣量≥300 mg。

(3)植物組織樣本:建議送樣量≥500 mg。

樣本分組

至少2組樣品,包括對照組和實驗組,樣本數建議:3 Vs 3。

參考文獻

Brar GA, Weissman JS. Ribosome profiling reveals the what, when, where and how of protein synthesis. Nat Rev Mol Cell Biol. 2015. 16(11):651-664.

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Fremin BJ, Nicolaou C, Bhatt AS. Simultaneous ribosome profiling of hundreds of microbes from the human microbiome. Nat Protoc. 2021. 16(10):4676-4691.

Ingolia NT, Brar GA, Rouskin S, McGeachy AM, Weissman JS. The ribosome profiling strategy for monitoring translation in vivo by deep sequencing of ribosome-protected mRNA fragments. Nat Protoc. 2012. 7(8):1534-1550.

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Xu G, Greene GH, Yoo H, Liu L, Marqués J, Motley J, Dong X. Global translational reprogramming is a fundamental layer of immune regulation in plants. Nature. 2017. 545(7655):487-490.



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