即使對于高濃度樣品,也無需稀釋,就是根據物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。紫外分光光度計可以在紫外可見光區任意選擇不同波長的光。物質的吸收光譜就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應地發生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質就有其的、固定的吸收光譜曲線,可根據吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量。相應地發生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結果。先確定實驗條件,并在此條件下測得標準物質的吸收峰以及其對應波長值(同時可獲得該物質的大吸收波長);再在選定的波長范圍內(或大波長值處),分別以(不同濃度)標準溶液的吸光度和溶液濃度為橫、縱坐標繪出化合物溶液的標準曲線得到其所對應的數學方程;接著在相同實驗條件下配制待測溶液,測得待測溶液的吸光度,后用已獲得的標準曲線方程求出待測溶液中所需測定的化合物的含量。