- QuickAntibody-Mouse5W-抗體制備佐劑-免疫佐劑
- QuickAntibody-Mouse5W用途
通過5周2針的標(biāo)準(zhǔn)免疫程序制備小鼠單克隆和多克隆抗體，ELISA滴度（Cutoff值為0.1000）可達(dá)到1:10000-1:。
QuickAntibody-Mouse5W 使用方法（詳見使用說明書）
1. 用生理鹽水將抗原稀釋到2倍終濃度（按每針次50μl用量配制）。
備注：推薦使用的抗原用量為
（1）免疫原性較強(qiáng)的滅活全 virus 或全細(xì)菌以及 virus 樣顆粒抗原每針次1-5μg；
（2）免疫原性較弱的亞單位蛋白抗原每針次5-20μg；
（3）偶聯(lián)了載體蛋白的小分子抗原每針次20-50μg。
2. 充分混勻佐劑，無菌條件下取出所需用量（按每針次50μl）與抗原按體積比1:1迅速混勻。
備注：本佐劑產(chǎn)生沉淀屬正常現(xiàn)象，與抗原混合操作越快越好。
3. 通過后腿小腿肌肉注射免疫小鼠（ 視頻），每只小鼠注射100μl。
備注：本佐劑與抗原混合后產(chǎn)生沉淀屬正常現(xiàn)象，抽入針管前應(yīng)充分混勻，抽入針管后應(yīng)盡快注射。
4. 第21天按同樣方式加強(qiáng)免疫1針。
備注：每次佐劑和抗原現(xiàn)配現(xiàn)用。
5. 第35天采微量尾血進(jìn)行ELISA測定，抗體滴度應(yīng)在1:10000-1:范圍內(nèi)，隨后即可采全血或按常規(guī)方法進(jìn)行抗原沖擊免疫和脾細(xì)胞融合。
- 如何選擇 QuickAntibody 系列免疫佐劑？
- QuickAntibody系列免疫佐劑屬于一種新型免疫佐劑，分別用于制備小鼠單克隆和多克隆抗體（見下表）。
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 免疫周期 | 特點(diǎn) | 用途 | 預(yù)期滴度 |
| QuickAntibody -Mouse5W | KX0210041 | 1ml | 5周 | 標(biāo)準(zhǔn)免疫 | 小鼠單抗 小鼠多抗 | 1:10000- 1: |
| QuickAntibody -Mouse3W | KX0210042 | 1ml | 3周 | 快速免疫 | 小鼠單抗 小鼠多抗 | 1:10000- 1:100000 |
| QuickAntibody -Mouse2W | KX0210043 | 1ml | 2周 | 快速免疫 | 小鼠多抗 | 1:1000- 1:10000 |
| QuickAntibody -Rabbit8W | KX0210045 | 1ml | 8周 | 標(biāo)準(zhǔn)免疫 | 兔多抗 | 1:10000- 1:1000000 |
- QuickAntibody系列免疫佐劑有哪些特點(diǎn)？
與常規(guī)使用的弗氏佐劑相比，QuickAntibody免疫佐劑具有免疫周期短、針次少、無需乳化、抗原用量低、抗體滴度高、抗體親合力高、易獲得構(gòu)象型表位的抗體等多方面特點(diǎn)，詳述如下：
1. QuickAntibody只需兩針免疫，無論是用于單克隆還是多克隆抗體制備，與弗氏佐劑相比可減少免疫針次。
- 2. QuickAntibody通過減少免疫針次和降低每針次抗原用量，從而可大大節(jié)省總抗原用量。
- 推薦使用的抗原用量為（1）免疫原性較弱的亞單位蛋白抗原每針次5-50μg（通常為小鼠5-20μg，兔子20-50μg）；
- （2）免疫原性較強(qiáng)的滅活全病毒或全細(xì)菌以及病毒樣顆粒抗原每針次1-10μg（通常為小鼠1-5μg ，兔子5-10μg）。
3. QuickAntibody抗體產(chǎn)生快，抗體滴度高，抗體親合力高。以標(biāo)準(zhǔn)免疫程序?yàn)槔瑹o論是用于單克隆還是多克隆抗體制備，只需要在三周內(nèi)進(jìn)行兩針免疫，通常在第五周即可獲得ELISA滴度（Cutoff值為0.1000）高達(dá)1:10000-1:的高親合力抗體水平。
4. QuickAntibody不破壞抗原天然構(gòu)象，從而易于篩選獲得針對構(gòu)象型抗原表位的單克隆抗體，這是弗氏佐劑所不具備的一個重要特點(diǎn)。
5. QuickAntibody是水溶性佐劑，使用時不需要弗氏佐劑的復(fù)雜乳化過程，抗原和佐劑只需簡單混合即可免疫動物。
6. QuickAntibody使用肌肉免疫途徑，與常規(guī)小鼠單克隆抗體制備過程中使用足墊或脾內(nèi)免疫相比，極大方便了使用。
- 7. QuickAntibody的一個重要用途是可方便地用于制備小鼠多克隆抗體。常規(guī)多克隆抗體制備多使用兔子，不但免疫針次多、抗原用量大和抗體產(chǎn)生慢，而且由于技術(shù)要求較高而往往需要委托第三方單位制備。
- 使用QuickAntibody免疫佐劑，任何實(shí)驗(yàn)動物人員均可方便快速地制備小鼠多克隆抗體，標(biāo)準(zhǔn)免疫程序只需要簡單地免疫5只小鼠，即可在五周后獲得1ml高質(zhì)量的小鼠多克隆抗體。（推薦使用本佐劑制備小鼠多克隆抗體，1ml高質(zhì)量的小鼠多克隆抗體足以滿足絕大多數(shù)用戶的實(shí)驗(yàn)需求，包括用于酶聯(lián)免疫、免疫印跡、流式細(xì)胞、免疫組化和免疫沉淀等）。
- 8. QuickAntibody建議常溫運(yùn)輸，2~8oC保存，無菌取用，有效期18個月。
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