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sybr green熒光染料?-熒光定量PCR

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SYBR Green 熒光染料I 與 dsDNA 結(jié)合熒光信號(hào)可增強(qiáng) 800—1000 倍。在 PCR 反應(yīng)體系中,加入 適量 SYBR Green I 熒光染料,SYBR 熒光染料特異性地?fù)饺?DNA 雙鏈后,熒光信號(hào)增強(qiáng),而不 摻入鏈中的 SYBR Green I 染料分子熒光不變,從而保證熒光信號(hào)的增加與 PCR 產(chǎn)物的增加同步。熒光可以在退火階段或者延伸階段測(cè)定。
sybr green熒光染料?-熒光定量PCR 產(chǎn)品詳情

sybr green熒光染料-熒光定量PCR

sybr green熒光染料



熒光染料規(guī)格

一、SYBR Green 熒光染料熒光定量PCR 原理

SYBR Green 熒光染料 I 與 dsDNA 結(jié)合熒光信號(hào)可增強(qiáng) 800—1000 倍。在 PCR 反應(yīng)體系中,加入 適量 SYBR Green I 熒光染料,SYBR 熒光染料特異性地?fù)饺?DNA 雙鏈后,熒光信號(hào)增強(qiáng),而不 摻入鏈中的 SYBR Green I 染料分子熒光不變,從而保證熒光信號(hào)的增加與 PCR 產(chǎn)物的增加同步。熒光可以在退火階段或者延伸階段測(cè)定。

 二、使用方法: 

我們提供的為 20×的濃縮液,使用時(shí)可稀釋 20—100 倍,使反應(yīng)的終濃度為 1×到 0.2× 之間。例如配 50ul 總體積的 PCR 反應(yīng)液,應(yīng)加 20×的 SYBR Green I 染料 0.5ul—2.5ul。

 三、使用濃度對(duì)熒光 PCR 結(jié)果的影響

 SYBR Green 熒光染料 熒光定量 PCR 的試驗(yàn)成功有很多因素,但是 SYBR Green I 的使用濃度是非 常關(guān)鍵的因素 ,如果 SYBR Green I 的濃度過低會(huì)使熒光信號(hào)的變化降低。這就意味著低拷貝 的樣品可能無法檢出;而在高濃度時(shí),將會(huì)抑制 PCR 反應(yīng)。降低 PCR 反應(yīng)效率。所以一般在使 用 SYBR Green I 時(shí)應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況優(yōu)化使用濃度。

 四、鎂離子濃度的影響 

     提高鎂離子濃度可以降低 SYBR Green I對(duì) PCR 反應(yīng)的抑制作用。我們建議在用 SYBR Green I 進(jìn)行熒光 PCR 反應(yīng)時(shí),鎂離子濃度要比無 SYBR Green I 的普通 PCR 反應(yīng)要高出 0.5 至 3mM。

 五、SYBR Green 熒光染料 僅供科研使用。 

六、保存方法

避光,4 度運(yùn)輸,-20 度保存有效期 2 年。 

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