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  • 天根 瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 增強型-DP219

天根 瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 增強型-DP219

參考價
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  • 型號
  • 品牌
  • 所在地蘇州市
  • 更新時間2023-04-09
  • 廠商性質經銷商
  • 所在地區蘇州市
  • 實名認證已認證
  • 產品數量842
  • 人氣值3746
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天根 瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 增強型-DP219 ?快速:整個操作過程快速方便,十幾分鐘即可完成回收工作。 ?便捷:無需平衡液,室溫溶膠。 ?高效:的離心柱和精心配制的緩沖液,可以大量回收到高純度的目的DNA。
天根 瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 增強型-DP219 產品詳情

天根瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 增強型-DP219

目錄號 規格
DP219-02 50次
DP219-03 200次
產品簡介
本試劑盒采用可以高效率結合DNA的硅基質材料和的緩沖液系統,從TAE或 TBE瓊脂糖凝膠上回收DNA片段,同時除去蛋白質、其它有機化合物、無機鹽離子及寡核苷 酸引物等雜質,回收100 bp-15 kb DNA片段,回收率高達80%,每個離心吸附柱每次可吸附 的DNA量為10 μg。 
使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規操作,包括酶切、PCR、測序、文庫篩選、 連接和轉化等實驗。
產品特點

? 快速:整個操作過程快速方便,十幾分鐘即可完成回收工作。

? 便捷:無需平衡液,室溫溶膠。

? 高效:的離心柱和精心配制的緩沖液,可以大量回收到高純度的目的DNA。

下游應用

使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規操作,包括酶切、PCR、測序、文庫篩選、連接和轉化等實驗。

天根-瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒(增強型)(離心柱型) DP 219使用說明【點擊進入下載中心】

儲存條件

            ( 1 5 - 3 0  )          1 2         

淀 , 使 用 前 可 在 3 7 ℃ 水 浴 中 預 熱 1 0 m i n 以 溶 解 沉 淀 , 不 影 響 效 果 。

注意事項 請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項。  

1. 電泳時請使用新的電泳緩沖液,以免影響電泳和回收效果。

2. 如下一步實驗要求較高,則應盡量使用TAE電泳緩沖液。

3. 所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。

4. 切膠時,紫外照射時間應盡量短,以免對DNA造成損傷。

5. 如果回收率較低,可在膠充分溶解后檢測pH值,如pH值大于7.5,可向含有DNA的膠溶 液中加10-30μl3 M醋酸鈉(pH5.2)將pH值調到5-7之間。

6. 回收率與初始DNA量和洗脫體積有關,初始量越少、洗脫體積越少,回收率越低。 

   

使用前請先在漂洗液PW中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標簽。

1. 將單  的目的DNA條帶從瓊脂糖凝膠中切下(盡量切除多余部分)放入干凈的離心管

中,稱取重量。

注意:使用切膠器(OSE-GC)切膠時,切膠器口對準瓊脂糖凝膠中DNA條帶下壓切割。切膠完成后,推動中心桿,將膠塊推入干凈的離心管中。根據凝膠膠孔寬度可進行單次切割和連續切割。

2. 向膠塊中加入3倍體積溶膠液PE(如果凝膠重為0.1 g,其體積可視為100 μl,則加入300 μ溶膠液PE。使用切膠器切割1%的瓊脂糖凝膠,單塊重量約為0.06 g,實際膠塊重量與 凝膠濃度及厚度相關),室溫15-25℃溶膠5-10 min,其間不斷溫和地上下翻轉離心管,

以確保膠塊充分溶解。 若膠塊的體積過大,可事先將膠塊切成碎塊)。  

注意:對于大于5 kb以上的大片段或者是膠濃度大于1.5%的情況下,建議50℃加熱溶膠 5-10 min;膠塊溶解后將溶液溫度降至室溫再上柱,因為吸附柱在室溫時結合DNA的能力較強。

3. 將上 一 步所得溶液加入 一個吸附柱CA5中(吸附柱放入收集管中),室溫放置2 min, 12,000 rpm(~13,400×g )離心30-60 sec,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱CA5放入收集

管中。

注意:吸附柱容積為800 μl,若樣品體積大于800 μl可分批加入。

4. 向吸附柱CA5中加入600 μl漂洗液PW 使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),  12,000

rpm(~13,400×g)離心30-60 sec,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱CA5放入收集管中。

注意:如果回收的DNA是用于鹽敏感的實驗,例如平末端連接實驗或直接測序,建議PW加入后靜置2-5 min再離心。

5. 重復操作步驟4。

6. 將吸附柱CA5放回收集管中,12,000 rpm(~13,400×g )離心2 min,盡量除盡漂洗液。 將吸附柱CA5置于室溫放置數分鐘,地晾干,以防止殘留的漂洗液影響下一步的實 驗 。

注意:漂洗液中乙醇的殘留會影響后續的酶反應(酶切、PCR)實驗。

7. 將吸附柱CA5放到一個干凈離心管中,向吸附膜中間位置懸空滴加適量洗脫緩沖液TB, 室溫放置2 min 。12,000 rpm(~13,400×g)離心2 min收集DNA溶液。

注意:洗脫體積不應小于30 l,體積過少影響回收效率。洗脫液的pH值對于洗脫效率有  很大影響。若后續做測序,需使用ddH?O做洗脫液,并保證其pH7.0-8.5范圍內,pH  值低于7 .0會降低洗脫效率;且DNA產物應保存在-20℃,以防DNA降解。DNA也可以用 緩沖液(10 mM Tris-Cl,pH8.0)洗脫。為了提高DNA的回收量,可將離心得到的溶液重  新加回離心吸附柱中,室溫放置2 min,12,000 rpm(~13,400×g)離心2 min,將DNA  液收集到離心管中。

D N A       

回收得到的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。

DNA應在OD2so處有顯著吸收峰, OD26o值為1相當于大約50 μg/ml雙鏈DNA、40 μg/ml 單鏈DNA。

ODzsp/OD28o比值應為1.7-1.9,如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,而使用ddH?O,比值會偏 低,因為pH值和離子存在會影響光吸收值,但并不表示純度低。

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