ATP檢測(cè)試劑盒(ATP Assay Kit)可以用于檢測(cè)普通溶液、細(xì)胞或組織內(nèi)的ATP(adenosine 5'-triphosphate)水平。
ATP，作為最重要的能量分子在細(xì)胞的各種生理、病理過(guò)程中起著重要作用。ATP水平的改變，會(huì)影響細(xì)胞的功能。通常細(xì)胞在凋亡、壞死或處于一些毒性狀態(tài)下，ATP水平會(huì)下降，而高葡萄糖刺激等對(duì)于一些細(xì)胞可以上調(diào)細(xì)胞內(nèi)ATP水平。通常ATP水平的下降表明線(xiàn)粒體
ATP檢測(cè)試劑盒(ATP Assay Kit)可以用于檢測(cè)普通溶液、細(xì)胞或組織內(nèi)的ATP(adenosine 5'-triphosphate)水平。
ATP，作為最重要的能量分子在細(xì)胞的各種生理、病理過(guò)程中起著重要作用。ATP水平的改變，會(huì)影響細(xì)胞的功能。通常細(xì)胞在凋亡、壞死或處于一些毒性狀態(tài)下，ATP水平會(huì)下降，而高葡萄糖刺激等對(duì)于一些細(xì)胞可以上調(diào)細(xì)胞內(nèi)ATP水平。通常ATP水平的下降表明線(xiàn)粒體的功能受損或下降，在細(xì)胞凋亡時(shí)ATP水平的下降通常和線(xiàn)粒體的膜電位下降同時(shí)發(fā)生。
樣品制備非常簡(jiǎn)單。本試劑盒提供了可以用于細(xì)胞和組織裂解的ATP檢測(cè)裂解液，簡(jiǎn)單裂解后即可用于ATP檢測(cè)。
本試劑盒根據(jù)螢火蟲(chóng)螢光素酶(firefly luciferase，也稱(chēng)熒光素酶)催化螢光素產(chǎn)生螢光時(shí)需要ATP提供能量研制而成。當(dāng)螢火蟲(chóng)螢光素酶和螢光素都過(guò)量時(shí)，在一定的濃度范圍內(nèi)熒光的產(chǎn)生和ATP的濃度成正比，這樣就可以高靈敏地檢測(cè)溶液中的ATP濃度。本試劑盒在樣品體積為100微升時(shí)可以檢測(cè)濃度低達(dá)5nM的ATP。而常規(guī)的細(xì)胞或組織裂解液中ATP的濃度僅為0.1-1μM，一些常見(jiàn)細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)ATP水平約為10nmol/mg蛋白。并且本試劑盒的檢測(cè)濃度范圍非常大，檢測(cè)上限可以高達(dá)10μM，并在10nM-10μM范圍內(nèi)可以形成良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
使用本試劑盒中的ATP檢測(cè)裂解液裂解獲得的細(xì)胞或組織樣品，不僅可以用于ATP檢測(cè)，還可用于檢測(cè)蛋白濃度、進(jìn)行SDS-PAGE或一些常規(guī)的較易溶解蛋白的Western檢測(cè)。
本試劑盒的使用方便快捷，通常10-20個(gè)樣品可以在30-60分鐘內(nèi)測(cè)定完畢。
ATP檢測(cè)試劑盒的主要特點(diǎn)和差異如下：
| 產(chǎn)品編號(hào) | S0026 | S0026B | S0027 |
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | ATP檢測(cè)試劑盒 | ATP檢測(cè)試劑盒 | 增強(qiáng)型ATP檢測(cè)試劑盒 |
| 檢測(cè)靈敏度 | ++++ | +++ | +++++ |
| 特殊樣品兼容性 | ++++ | +++++ | ++++ |
| 信號(hào)值 | ++++ | +++ | +++++ |
| 信號(hào)穩(wěn)定性 | +++++ | ++++ | +++++ |
| 檢測(cè)下限(ATP) | 1nM | 5nM | 0.1nM |
| 檢測(cè)上限(ATP) | 10μM | 10μM | 10μM |
| 線(xiàn)性范圍(ATP) | 1nM-10μM | 10nM-10μM | 0.1nM-10μM |
| 推薦指數(shù) | ++++ | +++ | +++++ |
國(guó)際頂級(jí)期刊Cell發(fā)表的論文中注明使用了本產(chǎn)品(Cell. 2014 Jul 31;158(3):607-19)。
一個(gè)包裝的本試劑盒至少可以檢測(cè)200個(gè)樣品。
包裝清單：
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 包裝 |
| S0026B-1 | ATP檢測(cè)試劑 | 0.2ml(50μl/管，共4管) |
| S0026B-2 | ATP檢測(cè)試劑稀釋液 | 20ml |
| S0026B-3 | ATP標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.5mM) | 0.1ml |
| S0026B-4 | ATP檢測(cè)裂解液 | 100ml |
| — | 說(shuō)明書(shū) | 1份 |
保存條件：
-20℃保存，半年有效。-70℃保存，一年有效。ATP檢測(cè)試劑需避光保存。
注意事項(xiàng)：
ATP檢測(cè)試劑中含有螢光素酶，反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致其逐漸失活。盡管經(jīng)測(cè)試ATP檢測(cè)試劑反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)明顯影響，為取得較好的使用效果，建議用戶(hù)使用時(shí)的凍融次數(shù)不宜超過(guò)3次。ATP檢測(cè)試劑稀釋成ATP檢測(cè)工作液后，最好一次用完，不宜凍存后再使用。
ATP，特別是裂解后樣品中的ATP在室溫不太穩(wěn)定，需在4℃或冰上操作。ATP在冰上可以穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)6小時(shí)。
本試劑盒需使用luminometer，即化學(xué)發(fā)光儀(檢測(cè)螢光素酶報(bào)告基因時(shí)所用的儀器)。如果沒(méi)有l(wèi)uminometer，也可以使用液閃儀。液閃儀的測(cè)定效果取決于液閃儀的檢測(cè)靈敏度和檢測(cè)精度。
使用可檢測(cè)化學(xué)發(fā)光的多功能酶標(biāo)儀時(shí)，推薦使用孔和孔之間不透光的96孔白板或黑板。如使用普通的透明96孔板，須特別注意在檢測(cè)孔之間設(shè)置間隔孔，以減少鄰近孔之間的相互干擾。對(duì)于透明96孔板，一個(gè)發(fā)光孔可以使上下或左右鄰近孔的RLU值升高該孔的10-20%左右，使上下或左右間隔一個(gè)孔的鄰近孔的RLU值升高該孔的1%-4%左右；對(duì)于相同的樣品，底部不透光的96孔白板的化學(xué)發(fā)光讀數(shù)可以達(dá)到透明96孔板的5-10倍左右，達(dá)到底部透光96孔白板讀數(shù)的3倍左右(實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)會(huì)因96孔板、檢測(cè)儀器和樣品等的不同而存在差異)。
本試劑盒提供的ATP檢測(cè)裂解液可以有效裂解并釋放常見(jiàn)的培養(yǎng)細(xì)胞和組織中的ATP。對(duì)于一些特殊的組織或樣品，如果發(fā)現(xiàn)檢測(cè)出來(lái)的ATP水平顯著低于預(yù)期水平，可以在裂解樣品后并且在離心前，取部分樣品煮沸2分鐘以充分釋放ATP。煮沸后樣品中的蛋白會(huì)變性，從而會(huì)在后續(xù)的離心步驟中被沉淀，因此煮沸的樣品不能用于蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE和Western檢測(cè)。可以使用剩余的部分樣品進(jìn)行蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE和Western檢測(cè)。
本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
