B1免疫親和柱

Casco FastSep AFB1 貨號(hào)：C15001

簡(jiǎn)介

Casco FastSep AFB1免疫親和柱適用于基質(zhì)復(fù)雜、要求低的樣品中B1檢測(cè)的凈化。北京真菌毒素檢測(cè)試劑盒廠家價(jià)格可以進(jìn)行TLC、HPLC、GC、LC-MS/MS、EIA的定量分析，適用于谷物，食品，飼料等的樣品凈化過(guò)程。

柱容量 ≥300ng B1

儲(chǔ)存條件 2-8℃冷藏保存，不可冷凍

1 用途

用于實(shí)驗(yàn)室凈化樣品提取物以進(jìn)行進(jìn)一步分析

2 概要

是谷類(lèi)及其他農(nóng)作物常見(jiàn)的霉變菌，是由黃曲霉和寄生曲霉產(chǎn)生的一類(lèi)低分子化合物。污染糧食、油料作物的種子，其中以花生、玉米*易被污染，另外在小麥、高粱、巴西堅(jiān)果、豆類(lèi)和大米等重要糧食中也經(jīng)常被檢出。

作為肝癌的三大誘因之一，也是胃癌，腸癌等疾病的主要原因，對(duì)人類(lèi)的健康構(gòu)成很大威脅。世界各國(guó)對(duì)食品，飼料中的都有嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)。

3 原理

測(cè)定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)，免疫親和柱中含有和B1抗體結(jié)合在一起的凝膠，樣品中的B1經(jīng)過(guò)提取、過(guò)濾、稀釋?zhuān)缓缶徛耐ㄟ^(guò)黃曲霉B1免疫親和層析柱，在免疫親和柱內(nèi)B1與抗體結(jié)合，其他的無(wú)關(guān)物質(zhì)不會(huì)結(jié)合而直接通過(guò)免疫親和柱，之后洗滌免疫親和柱除去沒(méi)有被結(jié)合的其他無(wú)關(guān)物質(zhì)。*加入甲醇將B1釋放，然后注入到分析儀器中進(jìn)行檢測(cè)。

4 提供的試劑

l 20支/盒免疫親和柱，規(guī)格：3ml

l 說(shuō)明書(shū)

5 操作者應(yīng)注意事項(xiàng)

l B1對(duì)人體有害，應(yīng)戴手套操作。

l 使用過(guò)的玻璃容器及溶液*用5%濃度的次氯酸鈉溶液浸泡*。

l 不要使用過(guò)了有效日期的免疫親和柱。

l 親和柱于2-8℃冷藏保存，不可冷凍

l 使用前，免疫親和層析柱需回至室溫（22-25℃）

6 操作流程

l 粉碎好的樣品過(guò)20目篩并在取樣前混合，不立即分析的樣品應(yīng)放在冰箱中儲(chǔ)存。

l 稱(chēng)取20g粉碎樣品及4g氯化鈉，加入100ml 70%甲醇/水。

l 高速均質(zhì)約2分鐘，或震蕩器震蕩約30分鐘。

l 過(guò)濾樣品至少10ml。

l 取10ml濾液加入20ml水*，混合。

l 用玻璃纖維濾紙過(guò)濾至澄清，取15ml（相當(dāng)于1g樣品）準(zhǔn)備加入到免疫親和柱中過(guò)柱。

l 將10ml注射器連接于免疫親和柱上端。

l 處理好的樣品液15ml以1-2滴/秒的速度通過(guò)免疫親和柱，棄掉流出的液體。

l 加10ml水淋洗柱子兩次，棄掉流出的液體。

l 利用真空設(shè)備壓入空氣或用注射器吹干柱中水。

l 加入1ml甲醇緩慢洗脫，流速約為2-3秒每滴。

l 收集全部洗脫液于干凈的比色皿或其他容器中用于檢測(cè)。

*糧谷類(lèi)樣品用水稀釋?zhuān)l(fā)酵類(lèi)或雜質(zhì)干擾很大的樣品提取液，則用20mMPBS進(jìn)行更大倍數(shù)的稀釋?zhuān)ㄒ话銥?/SPAN>10倍），以確保親和柱中抗體與樣品提取液中抗原特異性結(jié)合的能力不受影響。

20mMPBS：0.62g NaH₂PO₄?2H₂O + 5.73g Na₂HPO₄?12H₂O+9g NaCl，蒸餾水溶解并定容至1000ml，調(diào)PH至7.4。

7 操作流程圖

8 液相色譜測(cè)定條件

l 激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)：360nm/440nm

l 流動(dòng)相：甲醇-水（45+55）

l 流速：1mL/min

l 進(jìn)樣量：20ul

l 柱溫：30°C

l 反應(yīng)時(shí)間：10min

用進(jìn)樣器吸取20mL標(biāo)準(zhǔn)工作液注入高效液相色譜儀，在上述色譜條件下測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液的響應(yīng)值（峰高或峰面積），得到B₁標(biāo)準(zhǔn)溶液高效液相色譜圖。