B1免疫親和柱
Casco FastSep AFB1 貨號：C15001
簡介
Casco FastSep AFB1免疫親和柱適用于基質復雜、要求低的樣品中B1檢測的凈化。江西真菌毒素檢測試劑盒廠家價格可以進行TLC、HPLC、GC、LC-MS/MS、EIA的定量分析，適用于谷物，食品，飼料等的樣品凈化過程。
柱容量 ≥300ng B1
儲存條件 2-8℃冷藏保存，不可冷凍
1 用途
用于實驗室凈化樣品提取物以進行進一步分析
2 概要
是谷類及其他農(nóng)作物常見的霉變菌，是由黃曲霉和寄生曲霉產(chǎn)生的一類低分子化合物。污染糧食、油料作物的種子，其中以花生、玉米*易被污染，另外在小麥、高粱、巴西堅果、豆類和大米等重要糧食中也經(jīng)常被檢出。
作為肝癌的三大誘因之一，也是胃癌，腸癌等疾病的主要原因，對人類的健康構成很大威脅。世界各國對食品，飼料中的都有嚴格的標準。
3 原理
測定的基礎是抗原抗體反應，免疫親和柱中含有和B1抗體結合在一起的凝膠，樣品中的B1經(jīng)過提取、過濾、稀釋，然后緩慢的通過黃曲霉B1免疫親和層析柱，在免疫親和柱內(nèi)B1與抗體結合，其他的無關物質不會結合而直接通過免疫親和柱，之后洗滌免疫親和柱除去沒有被結合的其他無關物質。*加入甲醇將B1釋放，然后注入到分析儀器中進行檢測。
4 提供的試劑
l 20支/盒免疫親和柱，規(guī)格：3ml
l 說明書
5 操作者應注意事項
l B1對人體有害，應戴手套操作。
l 使用過的玻璃容器及溶液*用5%濃度的次氯酸鈉溶液浸泡*。
l 不要使用過了有效日期的免疫親和柱。
l 親和柱于2-8℃冷藏保存，不可冷凍
l 使用前，免疫親和層析柱需回至室溫（22-25℃）
6 操作流程
l 粉碎好的樣品過20目篩并在取樣前混合，不立即分析的樣品應放在冰箱中儲存。
l 稱取20g粉碎樣品及4g氯化鈉，加入100ml 70%甲醇/水。
l 高速均質約2分鐘，或震蕩器震蕩約30分鐘。
l 過濾樣品至少10ml。
l 取10ml濾液加入20ml水*，混合。
l 用玻璃纖維濾紙過濾至澄清，取15ml（相當于1g樣品）準備加入到免疫親和柱中過柱。
l 將10ml注射器連接于免疫親和柱上端。
l 處理好的樣品液15ml以1-2滴/秒的速度通過免疫親和柱，棄掉流出的液體。
l 加10ml水淋洗柱子兩次，棄掉流出的液體。
l 利用真空設備壓入空氣或用注射器吹干柱中水。
l 加入1ml甲醇緩慢洗脫，流速約為2-3秒每滴。
l 收集全部洗脫液于干凈的比色皿或其他容器中用于檢測。
*糧谷類樣品用水稀釋，發(fā)酵類或雜質干擾很大的樣品提取液，則用20mMPBS進行更大倍數(shù)的稀釋（一般為10倍），以確保親和柱中抗體與樣品提取液中抗原特異性結合的能力不受影響。
20mMPBS：0.62g NaH2PO4?2H2O + 5.73g Na2HPO4?12H2O+9g NaCl，蒸餾水溶解并定容至1000ml，調(diào)PH至7.4。
7 操作流程圖
8 液相色譜測定條件
l 激發(fā)/發(fā)射波長：360nm/440nm
l 流動相：甲醇-水（45+55）
l 流速：1mL/min
l 進樣量：20ul
l 柱溫：30°C
l 反應時間：10min
用進樣器吸取20mL標準工作液注入高效液相色譜儀，在上述色譜條件下測定標準溶液的響應值（峰高或峰面積），得到B1標準溶液高效液相色譜圖。
