B1免疫親和柱
Casco FastSep AFB1 貨號：C15001
簡介
Casco FastSep AFB1免疫親和柱適用于基質(zhì)復(fù)雜、要求低的樣品中B1檢測的凈化。河南真菌毒素檢測試劑盒廠家可以進行TLC、HPLC、GC、LC-MS/MS、EIA的定量分析，適用于谷物，食品，飼料等的樣品凈化過程。
柱容量 ≥300ng B1
儲存條件 2-8℃冷藏保存，不可冷凍
1 用途
用于實驗室凈化樣品提取物以進行進一步分析
2 概要
是谷類及其他農(nóng)作物常見的霉變菌，是由黃曲霉和寄生曲霉產(chǎn)生的一類低分子化合物。污染糧食、油料作物的種子，其中以花生、玉米*易被污染，另外在小麥、高粱、巴西堅果、豆類和大米等重要糧食中也經(jīng)常被檢出。
作為肝癌的三大誘因之一，也是胃癌，腸癌等疾病的主要原因，對人類的健康構(gòu)成很大威脅。世界各國對食品，飼料中的都有嚴格的標準。
3 原理
測定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)，免疫親和柱中含有和B1抗體結(jié)合在一起的凝膠，樣品中的B1經(jīng)過提取、過濾、稀釋，然后緩慢的通過黃曲霉B1免疫親和層析柱，在免疫親和柱內(nèi)B1與抗體結(jié)合，其他的無關(guān)物質(zhì)不會結(jié)合而直接通過免疫親和柱，之后洗滌免疫親和柱除去沒有被結(jié)合的其他無關(guān)物質(zhì)。*加入甲醇將B1釋放，然后注入到分析儀器中進行檢測。
4 提供的試劑
l 20支/盒免疫親和柱，規(guī)格：3ml
l 說明書
5 操作者應(yīng)注意事項
l B1對人體有害，應(yīng)戴手套操作。
l 使用過的玻璃容器及溶液*用5%濃度的次氯酸鈉溶液浸泡*。
l 不要使用過了有效日期的免疫親和柱。
l 親和柱于2-8℃冷藏保存，不可冷凍
l 使用前，免疫親和層析柱需回至室溫（22-25℃）
6 操作流程
l 粉碎好的樣品過20目篩并在取樣前混合，不立即分析的樣品應(yīng)放在冰箱中儲存。
l 稱取20g粉碎樣品及4g氯化鈉，加入100ml 70%甲醇/水。
l 高速均質(zhì)約2分鐘，或震蕩器震蕩約30分鐘。
l 過濾樣品至少10ml。
l 取10ml濾液加入20ml水*，混合。
l 用玻璃纖維濾紙過濾至澄清，取15ml（相當于1g樣品）準備加入到免疫親和柱中過柱。
l 將10ml注射器連接于免疫親和柱上端。
l 處理好的樣品液15ml以1-2滴/秒的速度通過免疫親和柱，棄掉流出的液體。
l 加10ml水淋洗柱子兩次，棄掉流出的液體。
l 利用真空設(shè)備壓入空氣或用注射器吹干柱中水。
l 加入1ml甲醇緩慢洗脫，流速約為2-3秒每滴。
l 收集全部洗脫液于干凈的比色皿或其他容器中用于檢測。
*糧谷類樣品用水稀釋，發(fā)酵類或雜質(zhì)干擾很大的樣品提取液，則用20mMPBS進行更大倍數(shù)的稀釋（一般為10倍），以確保親和柱中抗體與樣品提取液中抗原特異性結(jié)合的能力不受影響。
20mMPBS：0.62g NaH2PO4?2H2O + 5.73g Na2HPO4?12H2O+9g NaCl，蒸餾水溶解并定容至1000ml，調(diào)PH至7.4。
7 操作流程圖
8 液相色譜測定條件
l 激發(fā)/發(fā)射波長：360nm/440nm
l 流動相：甲醇-水（45+55）
l 流速：1mL/min
l 進樣量：20ul
l 柱溫：30°C
l 反應(yīng)時間：10min
用進樣器吸取20mL標準工作液注入高效液相色譜儀，在上述色譜條件下測定標準溶液的響應(yīng)值（峰高或峰面積），得到B1標準溶液高效液相色譜圖。
