描述：(1)公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株；(2)細(xì)胞株數(shù)量約 5×105/瓶；(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
      發(fā)貨：客戶(hù)可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿(mǎn)50ml左右*培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶(hù)可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮細(xì)胞株，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

收到凍存細(xì)胞的處理方法：
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基；
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞）；
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒(méi)有透氣孔的話(huà)，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕； 
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
 

iFABP(Human intestinal fatty acid binding protein) ELISA Kit  人腸脂肪酸結(jié)合蛋白  96T
OxLDL(Human oxidized lowdensity lipoprotein) ELISA Kit  人氧化低密度脂蛋白  96T
MPIF-1/CCL23(Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1) ELISA Kit  人骨髓抑制因子

Anti-Dnmt3β  DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3β抗體  0.1ml
Anti-DPPA2    多能發(fā)育相關(guān)基因2抗體  0.2ml
Anti-DR3/TNF-αR/TRAMP    TNF-α膜受體抗體/DR3 死亡受體3抗體  0.1ml
Anti-DR4/APO2/TRAILR1    死亡受體4抗體  0.1ml
Anti-DTNBP1    精神分裂癥易感基因抗體  1ml
Anti-DVL1    蓬亂蛋白1抗體  0.2ml
Anti-Dynamin 2   兔抗人鳥(niǎo)苷三磷酸酶－發(fā)動(dòng)蛋白2抗體  0.1ml
Anti-E2F1   轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體  0.1ml
Anti-E2F2   轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體  0.1ml
Anti-E7 protein    人乳頭瘤病毒16型E7抗體  0.1ml
Anti-EAAT1/Glast   膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸運(yùn)載蛋白1 抗體  0.1ml
Anti-EBNA-3    EB病毒編碼核蛋白-3抗體  0.1ml
Anti-ECE1   內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1ECE1抗體  0.1ml
Anti-ECG2    食道癌相關(guān)基因抗體  0.1ml
Anti-ECM1    細(xì)胞外基質(zhì)蛋白1抗體  0.2ml
Anti-ED-1    外胚層發(fā)育不良抗體  0.1ml
Anti-EGF-R    表皮生長(zhǎng)因子受體抗體  0.1ml
Anti-EGFR-ⅤⅢ   表皮生長(zhǎng)因子受體-8抗體  0.2ml
Anti-Egr-1    早期反應(yīng)基因-1/應(yīng)急反應(yīng)生長(zhǎng)基因1抗體  0.1ml
Anti-Emp1    表皮膜蛋白1抗體  0.2ml
anti-EMAb   抗子宮內(nèi)膜抗體  0.2ml
Anti-Endostatin   內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁抗體  0.1ml
Anti-EpCAM   上皮細(xì)胞粘附分子/表皮細(xì)胞粘附分子抗體  0.2ml
Anti-EPEC-IgG O    大腸埃希桿菌O抗體  0.2ml
Anti-EphA2 R   酪氨酸蛋白激酶受體A2抗體  0.1ml
Anti-EphB2 R    酪氨酸蛋白激酶受體B2抗體  0.1ml
Anti-ER   雌激素受體  0.1ml
Anti-ERAB   內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白抗體  0.2ml

1  96T
ADP(Human adiponectin) ELISA Kit  人脂聯(lián)素  96T
HIS(Human Histamine) ELISA KIT  人組胺  96T
Human Resistin ELISA KIT   人抵抗素  96T
ALP-B(Human Bone-specific Alkphase B) ELISA Kit  人骨特異性堿性磷酸酶B  96T
OT/BGP(Human Osteocalcin/Bone gla protein) ELISA kit  人骨鈣素/骨谷氨酸蛋白  96T
sRANKL(Human soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand) ELISA Kit  人可溶性核因子κB受體活化因子配基  96T
1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3(Human 1,25-dihydroxyvitamin D3) ELISA Kit  人1,25二羥基維生素D3  96T
Human histon-H2b ELISA Kit  人組蛋白H2b  96T
OPG(Human Osteoprotegerin) ELISA KIT  人骨保護(hù)素  96T
BMPR- II (Human Bone morphogenetic protein receptor II ) ELISA Kit  人骨成型蛋白受體Ⅱ  96T
BMPR-1A(Human Bone morphogenetic protein receptor 1A) ELISA Kit  人骨成型蛋白受體1A  96T
BMP-4(Human Bone morphogenetic protein 4) ELISA Ki  人骨成型蛋白4  96T
BMP-2(Human Bone morphogenetic protein 2) ELISA Kit  人骨成型蛋白2  96T
cAMP(Human cyclic adenosine monophosphate) ELISA Kit  人環(huán)磷酸腺苷  96T
MASP(Human mannan binding lectin associated serine protease) ELISA Kit  人甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲氨酸蛋白酶  96T
CDK-7(Human Cyclin-dependent kinase 7) ELISA Kit  人周期素依賴(lài)性激酶7  96T
CDK-2(Human Cyclin-dependent kinase 2) ELISA Kit  人周期素依賴(lài)性激酶2  96T
CDK-1(Human Cyclin-dependent kinase 1) ELISA Kit  人周期素依賴(lài)性激酶1  96T
AMPK(Human Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase) ELISA kit  人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶  96T
LDH(Human Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit  人乳酸脫氫酶  96T
ADAM9(Human A Disintegrin And Metalloprotease 9) ELISA Kit  人解整合素樣金屬蛋白酶9  96T
BACE2(Human beta-site APP-cleaving enzyme 2) ELISA Kit  人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2  96T
UPP1(Human uridine phosphorylase 1) ELISA Kit  人尿嘧啶核苷磷酸化酶1  96T
22RV1前列腺癌細(xì)胞價(jià)格ADH(Human alcohol dehydrogenase) ELISA Kit  人乙醇脫氫酶  96T
RND1(Human Rho family GTPase 1) ELISA Kit  人Rho家族GTP酶1  96T
RIPK2(Human receptor TNFRSF-interacting serine-threonine kinase 2) ELISA Kit  人受體TNFRSF結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶2  96T
注意事項(xiàng)：
1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。