食用菌的菌種生產方法及滅菌設備!
食用菌的菌種生產方法及滅菌設備!
食用菌生產上對培養基常用的滅菌方法為濕熱滅菌( moist heat sterilization),是通過蒸汽殺死微生物的方法。在同一溫度下,濕熱滅菌比干熱滅菌( dry heat strelization)效果好,因為濕熱滅菌的穿透力比干熱滅菌大,殺傷力強。蛋白質、原生質膠體在濕熱條件下容易變性凝固,酶系統容易被破壞,而且蒸汽進入細胞凝結成水,放出潛在的熱量而提高了環境溫度,使殺菌力增強。
一、常用的濕熱滅菌設備
⒈高壓蒸汽滅菌器(high pressure steam sterilizer) 它是利用濕熱滅菌的一種高效滅菌器,使用方便,應用普遍。主要構造和功能為:①罐體內放瓶(袋)等滅菌物;②壓力表指示鍋內壓力及溫度;③排氣閥排除冷凝空氣;④安全閥在超過規定的壓力時自動放氣降壓。市售的有手提式、立式和臥式三種形式。其中立式分為普通型和自動型。手提式和立式的容量較小,一般用于一級菌種培養基的滅菌;臥式的容量大,用于二級菌種、三級菌種培養料的滅菌,熱源可用電、煤氣或直接通蒸汽。另外還有自制高壓滅菌鍋,鍋身由8~10mm鋼板制成,鍋蓋厚1.0~1.5cm,凸起成半圓形,鍋上裝有壓力表、溫度表和安全閥,鍋的容量為可裝800~1000瓶(袋)不等,熱源可用煤、柴等。此外,家用壓力鍋也可用來做一級菌種培養基的滅菌。
手提式高壓滅菌器
1-提柄;2-壓力表;3-安全閥;4-器蓋;5-器身;6-提環;7-放氣;8-翼狀螺帽;9-橡膠墊圈;10-螺絲;11-金屬軟管;12-圓柱;13-置物筒;14-篩架;15-腳架
立式高壓蒸汽滅菌器
1-放氣開關;2-拉蓋把手;3-架水漏斗;4-加水開關;5-玻璃管上開關;6-玻璃管;7治水標志;8玻璃管下開關;9-玻璃管放水開關;10-加熱處;11-壓蓋螺帽;12-壓力表;13,14-安全閥重垂;15-內鍋放水開關;16-大扳手
高壓滅菌時掌握的蒸汽壓力和滅菌時間,以不同的培養基而定,瓊脂培養基多采用0. 11MPa,121℃,20~30min;固體培養基多采用0.11~0.14MPa,123~128℃,l~1. 5h。袋裝培養基因容量大,滅菌時間延長至2h以上。
⒉常壓蒸汽滅菌灶(atmospheric press steam sterilizer) 根據生產量自制容積適宜的常壓蒸汽滅菌灶,它經濟實惠、結構簡單,可用于二級菌種、三級菌種培養料的滅菌。目前,我國多采用自制的蒸籠或利用鋼板、磚、水泥等砌成大型流通蒸汽滅菌灶進行常壓蒸汽滅菌。無論哪種形式,也不論采用哪種材料,常壓蒸汽滅菌灶均要求有較高的密閉性,這樣滅菌效果才能好,又可節省燃料,密閉性高的,溫度可達105℃,反之則達不到100℃。
磚墻時滅菌灶
1-墻框;2-柵格;3-爐柵;4-煙囪;5-小水鍋;6-水溝
蒸汽通入式滅菌灶
1-支架;2-爐膛;3-水位檢驗器;4-熱管;5-盛水器;6-煙囪;7-排氣孔;8-注水管
常壓滅菌的注意事項如下:
①滅菌瓶(袋)在鍋內擺放不宜過密,層與層之間要用層屜或菌袋筐分開,便于蒸汽在鍋內均勻流通。
②當加熱發生蒸汽時,打開下面的排氣孔,排出冷空氣。當有直沖蒸汽排出時,即可關閉排氣孔,待溫度升到100℃時,開始計時,連續保持8h以上,即可殺死耐熱性的芽孢。
③點火加熱前將鍋內和預熱鍋加足水,在滅菌過程中要注意鍋內的水位,要隨時添水,防止燒干鍋。
在滅菌的全過程中,火力應按猛攻一恒溫一徐降的過程操作。即開始火宜猛,盡快達到100℃,時間為2h左右為宜,防止升溫緩慢,時間過長,引起原料變酸;當溫度升到100℃時,要保持溫度不變,不能時高時低影響滅菌效果。當到達滅菌溫度后再猛攻一會兒,然后讓鍋內溫度緩緩降低,降至80℃時,方可開門取物。
⒊多功能蒸汽爐 用常壓蒸汽滅菌灶,雖然成本比較低,但滅菌時間過長,而且出鍋、裝鍋費時費力。滅菌時鍋內水位很難控制,水加多了底層菌袋易進水,水少了又怕燒干鍋。多功能蒸汽爐具有以下優點。
①蒸汽爐體積小,重量輕,一人即可推動(帶有移動輪),可在裝袋場所就地滅菌,免去料袋裝鍋出鍋之勞苦。
②升溫比較快,容水200L,燒10min即可生成蒸汽。與常壓滅菌灶比較,可節省燃料40%以上。
③一爐多用,除可對料袋滅菌外,還可用蒸汽保護接種、培養料二次發酵、發菌室增溫、出菇棚增溫增濕、配制飽和鹽水、廚房做飯燒水等。
蒸汽爐的滅菌溫度介于常壓蒸汽滅菌與高壓蒸汽滅菌之間,一般常壓蒸汽滅菌灶滅菌溫度在80~100℃,高壓鍋在115~128℃,而蒸汽爐滅菌溫度在100~108℃。使用蒸汽爐滅菌,在裝袋場所就近整理地面,鋪一層竹竿、玉米秸或磚,目的是讓菌袋和地面隔離,防止滅菌時冷凝水浸袋。將料袋累積成梯形或方形,一般8~12層比較好。也可裝筐滅菌,多者一次可料袋滅菌4000個。擺好料袋后,蓋上兩層塑料布,為了保溫再蓋草簾。用磚或其他重物沿四周將兩層塑料布與草簾壓嚴,以防止蒸汽壓力將覆蓋物掀起。準備好后將蒸汽爐里的輸氣管插入袋垛底層的竹竿或磚縫隙中,向蒸汽爐內加水達到標準水位。爐火旺燒8~10min,爐內蒸汽壓力可達0.049MPa,此時打開排氣閥向料袋堆通放蒸汽,1.5h后料溫可達100℃以上。多功能蒸汽爐的使用壓力為0.049MPa,超過此壓力時自動放氣,安全可靠。旺火耗煤量為20~26kg/h,常火燃煤6~8kg/h。旺火耗水90kg/h,產汽量為90~120m3/h。當料堆中心溫度升至100℃時,繼續燒8~10h后停火,當料堆溫度降至80℃左右時,卸鍋冷卻,溫度降到30℃以下時開始接種。
二、常用的干熱滅菌設備常用的干熱滅菌設備為電熱恒溫干燥箱和鼓風干燥箱,食用菌生產上對一些接種器具和玻璃器皿的滅菌常用干熱滅菌,干熱滅菌不能用于培養基的滅菌。
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