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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

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磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 Hp-IgM ELISA Kit 幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA試劑盒

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CD86 MVP ELISA Kit 含錨蛋白重復(fù)序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族10抗體 大鼠 CD86 / B7-2 ELISA配對抗體 主要穹窿蛋白(MVP)ELISA試劑盒

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IL1B Ntn1 ELISA Kit 軸抑制蛋白2抗體 人 IL-1 beta / IL1B / IL-1F2 ELISA配對抗體 軸突生長誘向因子1(Ntn1)ELISA試劑盒

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CR2 CDK-2 ELISA Kit 脂肪酰*家族成員1抗體 人 CD21 ELISA配對抗體 周期素依賴性激酶2(CDK-2)ELISA試劑盒

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FAS TAF ELISA Kit 肌動蛋白結(jié)合蛋白DOC6抗體 人 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 ELISA配對抗體 腫瘤血管生長因子(TAF)ELISA試劑盒

ICAM1 TAA ELISA Kit AFG3樣蛋白2/脊髓小腦共濟失調(diào)蛋白28抗體 大鼠 ICAM-1 / CD54 ELISA配對抗體 腫瘤相關(guān)抗原(TAA)ELISA試劑盒

DH5α 感受態(tài)細胞100ul*20PLXDC1 TSTA ELISA Kit 激活素受體相互作用蛋白1抗體 人 TEM7 / PLXDC1 ELISA配對抗體 腫瘤特異性移植抗原(TSTA)ELISA試劑盒

SEMA4D TSGF ELISA Kit 醛固酮類還原酶家族7成員A2抗體 小鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 ELISA配對抗體 腫瘤特異性生長因子(TSGF)ELISA試劑盒
注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。