ELISA( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )即酶聯(lián)接免疫吸附劑測定，是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項技術(shù)自70 年代初問世以來，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。

工作原理

小鼠轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β)ELISA試劑盒說明書是一種結(jié)合抗原、抗體特異性反應(yīng)和酶對底物高效催化作用的高敏感性免疫學(xué)實驗技術(shù)。ELISA 的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)，洗滌使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開，再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，通過反應(yīng)使其結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶含量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。 實驗結(jié)果重復(fù)性差，同樣的操作，OD值上午1.5，下午0.9？ 樣品中所含物質(zhì)種類繁多，經(jīng)常擔(dān)心會干擾待測蛋白檢測？ 樣品只有一點(diǎn)點(diǎn)，做一遍都不夠，更別說設(shè)置復(fù)孔？ 說明書只提供血清血漿稀釋建議，偏偏你要測的這兩種都不是？ OK，現(xiàn)在這些統(tǒng)統(tǒng)不是問題。
 所有elisa試劑盒都經(jīng)過反復(fù)測試，保證結(jié)果重復(fù)性！

小鼠轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β)ELISA試劑盒說明書產(chǎn)品特點(diǎn)

1、靈敏度高：可檢測濃度低于1.0pg/ml的細(xì)胞因子含量，結(jié)果可靠；

2、樣本量少：檢測樣本只需50ul，是珍貴樣本檢測的理想選擇； 3、操作簡便：操作流程簡單明確，且試劑盒包括實驗所有必需試劑； 4、設(shè)備簡單：使用常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)化酶標(biāo)儀檢測（450nm）。 ELISA 的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化以及酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活 性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體反應(yīng)，洗滌使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物 與液體中的其他物質(zhì)分開，再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，通過反應(yīng)使其結(jié)合在固相載體上。此時，固相上的酶含量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的 比例。接著加入底物，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。

 ELISA試劑盒應(yīng)用領(lǐng)域 ?

 免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成分的定位 ?

 研究抗酶抗體的合成 ?

 檢測微量的免疫反應(yīng) ?

 定量檢測體液中抗原或抗體成份 ?

 本公司憑借多年的免疫學(xué)相關(guān)試劑盒研發(fā)經(jīng)驗，以高靈敏度、高特異性的elisa試劑盒及相關(guān)產(chǎn)品為依托，為客戶提供專業(yè)的ELISA技術(shù)服務(wù)。上海琛藝的技術(shù)服務(wù)人員擁有*的技術(shù)和豐富的經(jīng)驗，根據(jù)客戶需要制定實驗方案，高效、精確地完成ELISA檢測，確保實驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，同時提供專業(yè)的數(shù)據(jù)分析。 ?

 高品質(zhì)：憑借多年的生物試劑盒研發(fā)經(jīng)驗，提供高靈敏度、高特異性的ELISA檢測試劑盒； ?

 高質(zhì)量：技術(shù)服務(wù)人員擁有豐富的操作經(jīng)驗和*的技術(shù)，嚴(yán)格操作，保證高效、精準(zhǔn)地完成檢測； ?

服務(wù)全：根據(jù)客戶實驗要求設(shè)計、制定實驗方案，同時為客戶提供專業(yè)的數(shù)據(jù)分析服務(wù)； ?

 價格低：以*惠的價格為客戶提供較全面的服務(wù)，幫助客戶有效節(jié)約科研經(jīng)費(fèi)； ?

時間短：擁有全套檢測設(shè)備和專業(yè)實驗平臺，在短的時間內(nèi)為客戶提供服務(wù)。

小鼠轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β)ELISA試劑盒可用于測定抗原，也可用于測定抗體，根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測的具體條件，選擇不同類型的檢測方法：

常用方法有： ? 間接法 ? 傳染病的診斷等。 ? 雙抗體夾心法 ? 此法適用于檢驗各種蛋白質(zhì)等大分子抗原，例如HBsAg、HBeAg、AFP等。 ? 抗原競爭法 ? 小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法。 ? 捕獲法 ? 在臨床檢驗中測定抗體IgM 時多采用捕獲包被法。 ELISA檢測技術(shù)服務(wù) 分類 除了以上常見的4種檢測方法外，還有直接法、捕獲包被法、競爭法(測抗體)、ABSELISA法等其他方法

  人Elisa試劑盒載體的物質(zhì)很多，較常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能，抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后保留原來的免疫 活性。聚苯乙烯為塑料，可制成各種形式。在 ELISA 測定過程中，它作為載體和容器，不參與化學(xué)反應(yīng)。加之它的價格低廉，所以被普遍采用。 ?

 ELISA試劑盒 載體的形狀主要有三種：小試管、小珠和微量反應(yīng)板。 ?

 較常用的載體為微量反應(yīng)板，于 ELISA 測定的產(chǎn)品也稱為 ELISA 板，通用的標(biāo)準(zhǔn)板形是 8×12 的 96 孔式。 ?

抗原和抗體 ?

在 ELISA 檢測過程中，抗原和抗體的敏感性以及特異性是決定實驗是否成功的關(guān)鍵因素。要求所用抗原純度高，抗體效價高、親和力強(qiáng)。 ?

 ELISA 所用抗原有三個來源：天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原。 ? 用于 ELISA 的抗體有多克隆抗體和單克隆抗體。 ?免疫吸附劑 ? 固相的抗原或抗體稱為免疫吸附劑。 ? 將抗原或抗體固相化的過程稱為包被（coating）。由于載體的不同，包被的方法也不同。 ? 如以聚苯乙烯 ELISA 板為載體，通常將抗原或抗體溶于緩沖液（較常用pH9.6 的碳酸緩沖液）中，加于 ELISA 板孔中在 4℃過夜，經(jīng)清洗后即可 應(yīng)用。如果包被液中的蛋白質(zhì)濃度過低，固相載體表面有能被此蛋白質(zhì)*覆蓋，其后加入的血清標(biāo)本和酶結(jié)合物中的蛋白質(zhì)也會部分地吸附于固相載體表面，后產(chǎn)生非特異性顯色而導(dǎo)致本底偏高。在這種情況下，如在包被后再用 1％～5％牛血清白蛋白包被一次，可以消除這種干擾，這一過程稱為封閉（blocking）。 包被好的 ELISA 板在低溫可放置一段時間而不失去 其免疫活性 ? 酶和底物 ? ELISA 中所用的酶要求純度高、催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高、專一性強(qiáng)、性質(zhì)穩(wěn)定、來源豐富、價格低廉、制備成的酶標(biāo)抗體或抗原性質(zhì)穩(wěn)定，保留其活性部分和催化能力。在受檢標(biāo)本中不存在與標(biāo)記酶相同的酶。 ?

上海琛藝elisa試劑盒提供免費(fèi)代檢測服務(wù)，我們將在短時間內(nèi)將檢測報告交給您！本公司是國內(nèi)的實力的科研試劑供應(yīng)單位,產(chǎn)品齊全,*上海elisa試劑盒，培養(yǎng)基，標(biāo)準(zhǔn)品，抗體等試劑產(chǎn)品。專業(yè)經(jīng)銷ELISA試劑盒多年,產(chǎn)品質(zhì)量有保證,售后服務(wù)有保障!

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 酶的相應(yīng)底物應(yīng)易于制備和保存，價格低廉，有色產(chǎn)物易于測定，光吸收高。 ? ELISA 中較常用的酶為辣根過氧化酶（HRP）和從牛腸粘膜或大腸桿菌提取的堿性磷酸酶（AP）。 ? 結(jié)合物 ? 酶標(biāo)記的抗原或抗體稱為結(jié)合物（conjugate）。 抗原由于化學(xué)結(jié)構(gòu)不同，可用不同的方法與酶結(jié)合。如為蛋白質(zhì)抗原，基本上可參考抗體酶標(biāo)記的方法。制備抗體酶結(jié)合物的方法通常有以下幾種。 ? 戊二醛交聯(lián)法戊二醛是一種雙功能團(tuán)試劑，可以使酶與蛋白質(zhì)或其他抗原的氨基通過它而偶聯(lián)。戊二醛交聯(lián)可用一步法（如連接 AP）， 也可用二 步法（如連接 HRP）。 ? 過碘酸鹽氧化法只用于 HRP 的交聯(lián)。該酶含 18％碳水化合物，過碘酸鹽將其分子表面的多糖氧化為醛基。用硼氫化na（NaBH4）中和多余的過 碘酸。酶上的醛根很活潑，可與蛋白質(zhì)結(jié)合，形成摩爾比例結(jié)合的酶標(biāo)結(jié)合物 ? 酶反應(yīng)終止液 ? 常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液的終體積而異，在板式ELISA中一般采用2mol/L。 ? 加樣 ? 在ELISA中一般有3次加樣步驟，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時應(yīng)將所加物加在ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡 ? 保溫 ? ELISA檢測 中一般涉及二次反應(yīng)，即加標(biāo)本后和加結(jié)合物。反應(yīng)的溫度和時間應(yīng)按規(guī)定的要求，保溫容器是水浴箱，可使溫度迅速平衡。各 ELISA 板不應(yīng)疊放。為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的濕盒中。濕盒是金屬的，傳熱容易。如用保溫箱，空濕盒應(yīng)預(yù)先放在其中，以平衡溫度，這在室溫較低時更為重要。加入底物后，反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。如室溫高于 20℃， ELISA 板可避光放在實驗臺上，以便不時觀察，待對照管顯色適當(dāng)時，即可終止酶反應(yīng)。   ? 洗滌 ? 洗滌在 ELISA 實驗中雖不是反應(yīng)過程，但卻是決定實驗成敗的關(guān)鍵。洗滌的目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。 ? ELISA 板的洗滌一般可采用以下方法： ① 吸干孔內(nèi)反應(yīng)液； ② 將洗滌液注滿板孔； ③ 放置 2min，略作搖動； ④ 吸干孔內(nèi)液，也可傾去液體后在吸水紙上拍干。 ? 洗滌的次數(shù)一般為 3～4 次，有時甚至需洗 5～6 次   ? 顯色 ? 顯色是ELISA實驗中后一步溫育反應(yīng)，此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內(nèi)，陰性孔可保持無色，而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行。在定量測定中，加入底物后的反應(yīng)溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。定性測定的顯色可在室溫進(jìn)行，時間一般不需要嚴(yán)格控制，有時可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯色的情況適當(dāng)縮短或延長反應(yīng)時間，及時判斷。   ? 比色 ? 如陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般可采用目視比色。如用比色計測定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA 板底的平整與透明度和比色 計的質(zhì)量。   ? 定性測定 ? 定性測定的結(jié)果判斷是對受檢標(biāo)本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡單回答，分別用"陽性"、"陰性"表示。"陽性"表示該標(biāo)本在該測定系統(tǒng)中有反應(yīng)。"陰性"則為無反應(yīng)。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果，即用滴度來表示反應(yīng)的強(qiáng)度，其實質(zhì)仍是一個定性試驗。在這種半定量測定中，將標(biāo)本作一系列稀釋后進(jìn)行試驗，呈陽性反應(yīng)的zui高稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的高低，可以判斷標(biāo)本反應(yīng)性的強(qiáng)弱，這比觀察不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判斷為強(qiáng)陽性、弱陽性更具 定量意義。 人ω干擾素(IFN-ω)Elisa試劑盒定量測定 ? ELSIA 操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，特別是固相載體的包被難達(dá)到各個體之間的*，因此在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。 ? 測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線的的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S 形，其頭、尾部曲線趨于平坦，*較呈直線的分是較理想的檢測區(qū)域。 ELISA檢測技術(shù)服務(wù) ELISA操作注意事項 嚴(yán)謹(jǐn)?shù)脑O(shè)計，優(yōu)質(zhì)的試劑盒，正確的操作和良好的檢測設(shè)備是保證ELISA結(jié)果 準(zhǔn)確可靠的關(guān)鍵   ? 樣品要求 ? 客戶需提供新鮮或正確保存的待檢測樣本，是液態(tài)類的樣本(細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿、血清、血漿、尿液、胸水、腹水、腦脊液等)，樣本量120ul/孔，建議提供足量樣本＞500μl； a) 細(xì)胞培養(yǎng)上清：離心去除沉淀，收集上清。 b) 血清、血漿：*提供血漿，一般不加抗凝劑，收集全血后立即離心，若必須使用抗凝劑，建議使用EDTA，避免使用*、檸檬酸溶液。收集血漿后，建議分裝保存，-70℃保存。樣本應(yīng)避免溶血，避免反復(fù)凍融，不接受高脂樣本。 c) 組織勻漿：建議液氮研磨，加入蛋白酶抑制劑。 d) 細(xì)胞勻漿：建議加入蛋白酶抑制劑。 ? 客戶需提供待檢測樣本詳細(xì)信息：如種屬來源、樣本類型等； ? 客戶需提供ELISA檢測試劑盒，也可由代購； ? 如需制備ELISA檢測試劑盒，需提供原料及詳細(xì)信息； ? 運(yùn)輸要求：參考《ELISA檢測生物送樣要求》，樣本應(yīng)避免各類污染和反復(fù)凍融。   ? 服務(wù)說明 ? 若因客戶提供ELISA檢測試劑盒原因?qū)е聦嶒炇。纱嗽斐傻膿p失由客戶承擔(dān)。 ? 客戶應(yīng)對所提供的材料及信息負(fù)責(zé)，如因客戶提供的材料及信息不準(zhǔn)確而引起的實驗延誤或經(jīng)濟(jì)損失由客戶承擔(dān)。 ? 因科學(xué)實驗的不確定性，實驗結(jié)果不一定會出現(xiàn)陽性結(jié)果，我們保證實驗結(jié)果的真實準(zhǔn)確性，但是對結(jié)果是否符合預(yù)期不做承諾。   保存條件：       標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存，1-2周內(nèi)有效，-20℃保存6個月內(nèi)有效；試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外，試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。 注意事項：       由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉，在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn)，所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。       洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶，請室溫水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再配制工作液。       為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性，標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后，如果有剩余請勿再次使用。       TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。       加樣時，請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。       由于本試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試，所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時，請獨(dú)立使用各個試劑盒中的試劑，請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。       充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要，在加液后請輕輕晃動整個96孔板，以保證混勻。       本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行，要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致終檢測到的吸光度顯著下降。       洗滌過程非常重要，洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。       檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測結(jié)果的可信度。       加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。 人ω干擾素(IFN-ω)Elisa試劑盒于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。       為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。