問：常用的DNA 濃度及純度檢測(cè)方法有哪些？
miRNA 尿素 -PAGE 上樣液 ,6×10mL品牌稱答：回收得到的DNA段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過對(duì)比定量的Marker 來(lái)定量濃度；紫外分光檢測(cè)OD260/280 比值，OD260/280 比值在1.7-1.9 之間說(shuō)明所得 DNA 純度較好，如果洗脫時(shí)不使用溶液Eluent而使用去離子水，比值會(huì)偏低，因?yàn)閜H 值和離子存在會(huì)影響光吸收值，但不表示純度低。
問：長(zhǎng)片段回收時(shí)應(yīng)注意哪些問題？
答：miRNA 尿素 -PAGE 上樣液 ,6×10mL品牌當(dāng)DNA 段長(zhǎng)度較長(zhǎng)（5 kb 以上）時(shí)，回收效率會(huì)有所下降，這是DNA 切膠回收時(shí)的常見現(xiàn)象。此時(shí)建議按以下方法解決問題：
1 適當(dāng)增加待回收DNA 樣品的點(diǎn)樣量；
2 由于長(zhǎng)段DNA 不易從樹脂上洗脫下來(lái)，建議洗脫兩次，可以提高洗脫效率；
3 減少操作過程中對(duì)長(zhǎng)段DNA 的物理?yè)p傷，如混合振蕩操作不要過于劇烈，切膠時(shí)不要將DNA 長(zhǎng)時(shí)間暴露在紫外等下。
miRNA 尿素 -PAGE 上樣液 ,6×10mL品牌的詳細(xì)介紹：
DNA提取流程圖：
公司miRNA 尿素 -PAGE 上樣液 ,6×10mL品牌的RNA/DNA提取目錄有下面10個(gè)系列，5000余種產(chǎn)品：點(diǎn)擊了解更核酸電泳及回收。
1、RNA純化系列產(chǎn)品
2、DNA純化系列產(chǎn)品
3、電泳及回收系列產(chǎn)品
4、探針標(biāo)記及檢測(cè)系列產(chǎn)品
5、核酸擴(kuò)增系列產(chǎn)品
6、克隆表達(dá)系列產(chǎn)品
7、基因組研究系列產(chǎn)品
8、蛋白質(zhì)研究系列產(chǎn)品
9、細(xì)胞生物學(xué)研究系列產(chǎn)品
10、即用型溶液、質(zhì)粒庫(kù)、菌種庫(kù)等等
實(shí)驗(yàn)步驟：
(1)miRNA 尿素 -PAGE 上樣液 ,6×10mL品牌實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說(shuō)了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::(25:24:1)抽提兩次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無(wú)水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
注意事項(xiàng)：
● miRNA 尿素 -PAGE 上樣液 ,6×10mL品牌溶液PE *次使用前請(qǐng)按瓶上標(biāo)簽加入4 倍體積的無(wú)水乙醇，即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 無(wú)水乙醇，20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無(wú)水乙醇，使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產(chǎn)品對(duì)電泳使用的Agarose 種類沒有嚴(yán)格限制，可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質(zhì)量和DNA 回收效率，希望使用高純度的Agarose ，但沒有必要一定要使用低熔點(diǎn)的Agarose 等。
● 電泳時(shí)請(qǐng)使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液，以免影響電泳及回收效果。
● 請(qǐng)適當(dāng)延長(zhǎng)電泳時(shí)間，在條帶分離清晰后進(jìn)行切膠回收，以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率，切膠時(shí)應(yīng)盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強(qiáng)。但如果DNA 濃度小，或DNA 初始量少，回收率將會(huì)偏低。
● 溶液Eluent（10 mM Tris-HCl, pH 8.5）中不含EDTA，其收集的DNA段可直接用于各種酶促反應(yīng)等，不會(huì)影響后續(xù)試驗(yàn)。
● 為了保證回收效率，請(qǐng)不要使用未調(diào)整pH 值的超純水洗脫目的段。
● 請(qǐng)嚴(yán)格按照操作步驟操作。
胰酶(1:4500) Pancreatin 8049-47-6 質(zhì)量規(guī)格：酶活1:4500,BR
胰酶(1:2500) Pancreatin 8049-47-6 質(zhì)量規(guī)格：酶活1:2500,BR
胰酶(1:250)，胰酶粉 Pancreatin 8049-47-6 質(zhì)量規(guī)格：酶活1:250,BR
胰高血糖素樣肽Ⅰ（7-36）酰胺，人 Glucagon-Like Peptide I (7-36),amide, human 107444-51-9 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
胰高血糖素樣肽-2（1-34)，人 GLP-2 (1-34) (human) 99120-49-7 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
胰高血糖素（19-29），牛，人，豬 Glucagon (19 - 29), bovine,human, porcine 64790-15-4 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
胰高血糖素（1-29），牛，人，豬 Glucagon (1 - 29), bovine,human, porcine 16941-32-5 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
胰多肽，人 Pancreatic Polypeptide,human 75976-10-2 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
胰多肽，大鼠 Pancreatic Polypeptide, rat 90419-12-8 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
胰島素樣生長(zhǎng)因子I（57-70） Insulin-like Growth Factor I (57-70) 18285 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅱ（69-84） Insulin-Like Growth Factor II(69-84) 50-01-37 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
胰島素(豬) INSULIN 12584-58-6 質(zhì)量規(guī)格：BR,來(lái)源豬胰臟
胰島素(牛) INSULIN 11070-73-8 質(zhì)量規(guī)格：BR，27U/mg,進(jìn)分
胰島素(牛) INSULIN 11070-73-8 質(zhì)量規(guī)格：BR，27U/mg,進(jìn)分
胰蛋白酶原 Trypsinogen >2500U/mg from bovine pancreas 2594173 質(zhì)量規(guī)格：BC
胰蛋白酶1:2500 Trypsin 1:2500 from Porcine pancreas 2594141 質(zhì)量規(guī)格：>2500U/MG
胰蛋白酶1:250 Trypsin 1:250 fromPorcine pancreas 2594141 質(zhì)量規(guī)格：>250U/mg,BR
胰蛋白胨(BD) Tryptone 73049-73-7 質(zhì)量規(guī)格：BD 211705
胰蛋白胨 Tryptone 73049-73-7 質(zhì)量規(guī)格：FMB Grade
miRNA 尿素 -PAGE 上樣液 ,6×10mL品牌Kinetensin規(guī)格：>95%,BR
KieselguhrG規(guī)格：TLC
Khasianine規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
Ketotifenfumarate規(guī)格：>99%,BR
Ketotifenfumarate規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Ketotifenfumarate規(guī)格：含量測(cè)定
KetorolacTromethamine規(guī)格：>98.5%,USP,BR
KetorolacTromethamine規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Ketorolac規(guī)格：>98%
Ketoprofen規(guī)格：>99%,AR
